內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
產(chǎn)品名稱：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件：2-8℃保存。開(kāi)蓋后組份按要求條件保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)存在于除哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞外的各種真核細(xì)胞中。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)為由生物膜構(gòu)成的互相通連的片層隙狀或小管狀系統(tǒng)，膜片間的隙狀空間成為池，通常與細(xì)胞外隙和細(xì)胞漿基質(zhì)之間不直接相通。這種細(xì)胞內(nèi)的膜性管道系統(tǒng)一方面構(gòu)成細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸?shù)耐?，另方面為?xì)胞內(nèi)各種各樣的酶反應(yīng)提供廣闊的反應(yīng)面積。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能與蛋白質(zhì)的合成，糖類和脂類的合成、解毒、同化作用有關(guān)，并且還具有運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)的功能。

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
鉤吻Gelsemium elegans 1,6,8-Trideoxyshanzhigenin 1,6,8-三脫氧山梔苷元 99173-00-9 C10H14O3 ≥90%

丹參同IIA-磺醋內(nèi)wo7iumtcnshinonqIIc-sulfonctqUV≥98%;20mg/支

黃芪皂苷I;黃芪皂甙I Astragaloside I 84680-75-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

標(biāo)準(zhǔn)試劑2-本乙酰胺130448-200501系統(tǒng)適用性

SoyasaponinⅤ(Soyasaponin Ba
22871-58-5 典昔蘭相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 100mg

*Andrographis paniculata *黃同苷C 113963-39-6 C23H24O10 ≥95% 維拉帕米 雜質(zhì)M(V0100026

(Z)-3-xy7noxy-5-metxoxystilbene 143207-76-5

錄霉素A多晶型標(biāo)準(zhǔn)品530-43-8100mg錄霉素A多晶型標(biāo)準(zhǔn)品

馬兜鈴酸A 313-67-7 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
云南含笑Michelia yunnanensis Pinoresinol 4-O-glucoside 松脂醇-4-O-beta-D-葡萄糖苷 69251-96-3 C26H32O11 ≥97%

異蓮心減IsoliqnsininqHPLC≥98%;20mg/支

地榆Sanguisorba officinalis Ziyuglycoside II 地榆皂苷Ⅱ 35286-59-0 C35H56O8 ≥98%

中藥對(duì)照藥材天121361-200401TLC法鑒別

wilfordine*定堿純度：≥97%
小鼠前動(dòng)力蛋白2(PK2)ELISA試劑盒 ，英文名： PK2 ELISA Kit

人維生素D2(VD2)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanVitaminD2,VD2ELISAKit 96T/48T

大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)免疫試劑盒 Rat Integrin αM,ITG/CD11b ELISA Kit

英文名稱HumanCollagenTypeIIELISAKit人II型膠原(CollagenTypeII)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

動(dòng)物組織醛同還原酶1A(aldo-ketoreductase1A)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

其它ELISA試劑盒
兔子生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat nitric oxide (NO) ELISA Kit 大鼠血清一氧化氮(NO)ELISA試劑盒

HumanComplement3,C3ELISAKit 人補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humandesmin,DesELISA試劑盒人結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織MAPKAPKINASE3激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit人磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人泛素分解酶(DUB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人反*狀腺原酸(rT3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝