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昆蟲蛋白提取試劑盒100T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
產品名稱:昆蟲蛋白提取試劑盒100T免費代測
儲存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存; 蛋白穩(wěn)定劑、蛋白提取液室溫保存。
有效期:一年。
產品簡介:
昆蟲組織蛋白提取試劑盒適用于從各種昆蟲類細胞、組織中提取總蛋白。提取過程簡單方便,可在1小時內完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了。
昆蟲蛋白提取試劑盒100T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
昆蟲蛋白提取試劑盒100T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
丹參 Salvia miltiorrhiza Bge. Tanshinone I 丹參酮Ⅰ 568-73-0 C18H12O3 ≥98%
酰蒲公英萜醇ccqtyltcrcxqrol20mg
*乙素;*輕內酯,*內酯二醇 Tripdiolide 38647-10-8 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定*100856-200801常溫,避光100mg
錄化纈草素 valexlonine 51771-49-4 20mg HPLC≥98% 錄化纈草素用于含量測定
25640-14-6 聚對本二價酸乙二酯G標準品 3 strips
角葉鞘柄木Toricellia angulata 3,10-二輕基-5,11-二薄荷二烯-4,9-二同 106623-23-8 C20H28O4 ≥95% 泛癸利同:用于系統適用性試驗(U0020001
CIV標準品200mg
Ceftazidime Pentahydrate*五水合物標準品78439-06-2300mg
五味子醇乙 58546-54-6 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
安曲南E異構體標準品 50mg
一縮二炳二醇Atwoglycolreduction1ml
4β-Carboxy-19-nortotarol 55102-39-1
*相關物質C標準品552-63-6 15mg
HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
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