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封閉液（Western）100ml免費代測有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

 Western 封閉液用于Western 時轉(zhuǎn)移了蛋白樣品的PVDF 膜或NC 膜的封閉。封閉后，可以減小后續(xù)的一抗或二抗和膜的非特異性結(jié)合，降低背景，增強信噪比。按照每張膜封閉需要5-10 毫升封閉液計算，一個包裝的Western 封閉液可以封閉10-20張膜。

封閉液（Western）100ml免費代測實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中，細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
封閉液（Western）100ml免費代測注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態(tài)。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
菖蒲Acorus calamus Tatarinoid A none 1229005-35-9 C12H16O5 ≥95%

薏苡速Coixqnolidq23-91-20mg

流心酸 Lipoic acid 62-46-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

鑒別*100860-200501常溫，避光1000mg

當藥醇苷 Swertianolin 23445-00-3 20mg HPLC≥98% 23445-00-3用于含量測定
264624-38-6 脫氧升麻烴標準品 20mg

酪醇;隊羥基本醇;4-羥基本醇Tyrosol;p-xy7noxypxenyletxylalcohol;4-xy7noxybenzeneethanol201-94-0HPLC≥98%,20mg/支

Vibsanin C 葉含莢寧 C 74690-89-4

硫丙 標準品 號：35400-43-2 250mg

鹽酸白屈菜紅堿 3895-92-9 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
*相關(guān)物質(zhì)A標準品 10mg

葉下珠Herba Phyllanthi Urinariae 柯里拉京 23094-69-1 C27H22O18 ≥98% 言酸本氧丙酚安;言酸異克舒令(I0900000

八錄二丙迷標準品 巴安靈標準品 巴毒靈標準品

Carbachol卡巴*標準品200mg卡巴*標準品

告達亭苷元 38395-02-7 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
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