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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測(cè)>> 增強(qiáng)型ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒50ml使用說明書
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更新時(shí)間:2017-07-05 11:10:12瀏覽次數(shù):252次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
產(chǎn)品名稱:增強(qiáng)型ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒50ml使用說明書
儲(chǔ)存條件:2-8℃避光保存。
有效期:一年
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
免疫印跡重要也是后一步就是酶與底物反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè),本試劑盒以化學(xué)熒光發(fā)光方法檢測(cè)蛋白質(zhì)或核酸類生物大分子。其原理是,蛋白質(zhì)或核酸在電泳后轉(zhuǎn)移到印跡膜上,以一抗及辣根過氧化物酶HRP標(biāo)記的二抗結(jié)合膜上的目的蛋白,或以HRP標(biāo)記的探針直接或間接結(jié)合膜上的核酸。洗膜后用本產(chǎn)品配制的ECL工作液,在可見光下室溫孵育膜數(shù)分鐘,將印跡膜用保鮮膜包被粘貼固定于X光片曝光暗盒。然后轉(zhuǎn)入暗室將X光膠片壓在膜上曝光數(shù)秒到數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)。
增強(qiáng)型ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒50ml使用說明書使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
增強(qiáng)型ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒50ml使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
增強(qiáng)型ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒50ml使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
云南紅豆杉Taxus yunnanensis Taxinine B 紫杉素 B 18457-44-8 C37H44O11 ≥95%
異橙皇同ISOsinqnsqtin20mg
蘆丁;蕓香苷;蕓香葉苷;維生素P;蘆丁蕓香苷;蕓香甙 Rutin 153-18-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
對(duì)照品鹽酸*130509-200301含量測(cè)定
楤木皂苷A Cantleyoside 7518-22-1 20mg/支 HPLC≥98% 楤木皂苷A用于含量測(cè)定
26675-46-7 異扶烷標(biāo)準(zhǔn)品(特殊運(yùn)輸) 1ml
當(dāng)藥寧Swertianolin088-72-120mg
22-xy7noxy-3-oxo-12-ursen-30-oic acid (22ALPHA)-22-輕基-3-氧代烏蘇-12-烯-30-酸 173991-81-6
Vecuronium Bromide *標(biāo)準(zhǔn)品50700-72-6 50mg*標(biāo)準(zhǔn)品
次大風(fēng)子素;Hydnocarpin 51419-48-8 10mg 訂購|咨詢
楝 Melia azedarach L. Toosendanin 苦楝素 58812-37-6 C30H38O11 ≥98%
葉皇制菌速Xcnthctin6791-73-120mg
沒食子酸乙酯;3,4,5-三輕基本乙酯 etxyl gallate 831-61-8 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
對(duì)照品*鈉130549-200501紅外鑒別
6'''-阿魏酰斯皮諾素 6'''-Feruloylspinosin 77690-92-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人鐵蛋白重鏈(FTH)免疫試劑盒 Human Ferritin, Heavy Polypeptide,FTH ELISA Kit
酸性木聚糖酶測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣
Ratsolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sTRAILELISA試劑盒大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanKallikrein6,KLK6ELISA試劑盒人*6(KLK6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanNetrin-4,Ntn4ELISAKit人軸突生長(zhǎng)誘向因子4(Ntn4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human angiopoietin 1 (ANG-1) ELISA Kit 人血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒
Humananti-cellmembraneDNAantibody,cmDNAELISAKit 人抗細(xì)胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanestrogen,EELISA試劑盒人雌激素(E)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織SRCN2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
Humanornithinecarbamoyltransferase,OCISAKit人*氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
增強(qiáng)型ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒50ml使用說明書人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α1抗胰*(AACT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α/β干擾素受體(IFN-α/βR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人XC趨化因子受體1(XCR1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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