當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測>> 洗滌液(Western)100ml售后服務(wù)
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更新時間:2017-07-05 11:14:11瀏覽次數(shù):136次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)洗滌液(Western)100ml售后服務(wù)注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
洗滌液(Western)100ml售后服務(wù)儲存條件:2-8℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
Western 洗滌液用于Western 時一抗二抗的孵育后的洗滌??梢杂行У慕档捅尘埃鰪娦旁氡?。
洗滌液(Western)100ml售后服務(wù)實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
我司洗滌液(Western)100ml售后服務(wù)本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
遠(yuǎn)志 Polygala tenuifolia Willd. Tenuifolin 細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷 20183-47-5 C36H56O12 ≥98%
愈創(chuàng)木酚Guciccol1990-2-120mg
*;四輕巴馬汀;延胡索乙素 Rotundine 10097-84-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定*100870-200801常溫,避光100mg
新苦參酮 Norkurarinone 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
27912-14-7 鹽酸佐旋布諾洛爾標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
庫拉索蘆薈 Aloe barbadensis Miller. 蘆薈苷A 1415-73-2 C21H22O9 ≥98% 匹地爾(T1820000
迷菌酯標(biāo)準(zhǔn)品 環(huán)草定標(biāo)準(zhǔn)品 利谷隆標(biāo)準(zhǔn)品
Rimantadine xy7nochloride *標(biāo)準(zhǔn)品1501-84-4 300mg
3-O-b-D-葡萄糖( 1→4)-[ 366814-43-9 HPLC≥98%;5mg 訂購|咨詢
鳶尾 Iris tectorum Maxim. Tectorigenin 鳶尾黃素 548-77-6 C16H12O6 ≥98%
野馬追內(nèi)酯Aqupctoriumlindlqycnumlcctonqc8778-41-810mg
魯斯可皂苷元;魯斯考皂苷元 Ruscogenin 472-11-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*酯130512-200201含量測定
補骨脂二氫黃酮甲醚;甲基補骨脂黃酮A;補骨脂雙氫黃酮甲醚 Bavachinin A 19879-30-2 20mg HPLC≥98% 補骨脂二氫黃酮甲醚用于含量測定
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