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更新時(shí)間:2017-07-05 11:19:35瀏覽次數(shù):190次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
Tris緩沖鹽溶液(10×TBS,pH8.0)500ml售后服務(wù)防己 Stephania tetrandra S.Moore Tetrandrine * 518-34-3 C38H42N2O6 ≥98%
一葉萩減Sqcurininq2610-40-20mg
麥冬皂苷D;麥冬皂甙D Ophiopogonin D 945619-74-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
對(duì)照品*130526-200201系統(tǒng)適應(yīng)性
*紅素 Celastrol 34157-83-0 20mg HPLC≥99% *紅素用于含量測(cè)定
產(chǎn)品名稱:Tris緩沖鹽溶液(10×TBS,pH8.0)500ml售后服務(wù)
儲(chǔ)存條件: 2-8℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
Tris緩沖鹽溶液簡(jiǎn)稱TBS,屬于常規(guī)pH緩沖液,常用于清洗WesternBlot中蛋白印跡膜或配制封閉液,是常用分子生物學(xué)試劑。
Tris緩沖鹽溶液主要成分為Tris-HCl(pH8.0)、防腐劑,不含Tween 20。
Tris緩沖鹽溶液(10×TBS,pH8.0)500ml售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
Tris緩沖鹽溶液(10×TBS,pH8.0)500ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Tris緩沖鹽溶液(10×TBS,pH8.0)500ml售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
2920-86-7 *龍琥珀酸半酯標(biāo)準(zhǔn)品 125mg
滇五味子Schisandra henryi var. yunnanensis 胭脂蟲酸 107783-45-9 C30H46O3 ≥95% 言酸輕嗪(H14 5000
錄酞酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品 錄肖安標(biāo)準(zhǔn)品 錄心流靈標(biāo)準(zhǔn)品
Capecitabine*標(biāo)準(zhǔn)品154361-50-9200mg*標(biāo)準(zhǔn)品
肉堿 541-15-1 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
70805-85-5 去氧孕烯相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
野甘草Scoparia dulcis none 189351-15-3 C13H20O3 ≥98% 言酸甲哌噻噸(M1808000
本草迷標(biāo)準(zhǔn)品 本草滅標(biāo)準(zhǔn)品 本達(dá)松(滅草松)
西酞普蘭相關(guān)物質(zhì)G標(biāo)準(zhǔn)品25mg
圣草次苷 13463-28-0 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
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