液體樣本蛋白提取試劑盒50T使用說明書使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：液體樣本蛋白提取試劑盒50T使用說明書
儲(chǔ)存條件：試劑C 2-8℃保存；試劑A和B室溫保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

液體樣品蛋白提取試劑盒適用于從細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)菌、酵母培養(yǎng)上清、腦脊液、尿液等液體樣品中提取蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時(shí)內(nèi)完成。提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。本試劑盒比傳統(tǒng)的液體蛋白提取TCA沉淀法沉淀效率高，重復(fù)性高，操作簡單。是TCA法沉淀效率的5-8倍。

液體樣本蛋白提取試劑盒50T使用說明書操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
液體樣本蛋白提取試劑盒50T使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
茶葉 Camellia sinensis(L.)O.Kuntze Theaflavin-3-Gallate 茶黃素-3-沒食子酸酯 30462-34-1 C36H28O16 ≥98%

鹽醋去輕駱駝蓬減Hcrminqxy7nochloridq343-7-120mg

冬青素A Ilexgenin A 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

檢查用鹽酸*雜質(zhì)A100881-200601常溫，避光50mg

櫟癭酸;櫟櫻酸 Roburic acid 6812-81-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測
29782-68-1 水飛薊寧標(biāo)準(zhǔn)品 20mg

丁香醋DingXiangsuan230-27-4HPLC≥98%,20mg/支

10-xy7noxydixy7noperaksine 10-輕基二輕派利文減 451478-47-0

甲氧錄普胺 標(biāo)準(zhǔn)品 號：7232-21-5 10g

硫酮鋅;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 13463-41-7 0.1g 訂購|咨詢
127-19-5 (N,N-Dimetxylacetamid 二類殘留溶劑-N,N-二甲基乙酰胺標(biāo)準(zhǔn)品 1.2ml×3ampules

野慈姑Sagittaria trifolia 13-表澤蘭醇 133005-15-9 C20H34O2 ≥95% *(F0 00000

乙醇測定用乙醇對照溶液標(biāo)準(zhǔn)品(乙醇水溶液)

Dicumarol雙羥標(biāo)準(zhǔn)品66-76-2200mg

車桑子Dodonaea viscosa Aliarin 5,7-二羥基-2-[4-羥基-3-(4-羥基-3-甲基丁基)本基]-3,6-二甲氧基-4H-1-本并-4-酮 84294-77-9 C22H24O8 ≥95%
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