昆蟲活性檢測試劑盒-AlamarBlue500T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
昆蟲活性檢測試劑盒-AlamarBlue500T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
昆蟲活性檢測試劑盒-AlamarBlue500T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
CHO(倉鼠卵巢細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CM-R098大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

CD300A Others Human 人 CD300A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

KYSE510細(xì)胞，人食管癌細(xì)胞 人惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,U87MG細(xì)胞 鼬肺上皮細(xì)胞;MV-1-Lu

小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Sp2/0-Ag14

CD226 Others Human 人 CD226 / DNAM-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
綿羊皮膚細(xì)胞;OAR-S1

IL13RA2 Others Canine 狗 IL13RA2 / IL13R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CL-0141LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

B16-F1細(xì)胞，鼠黑色素瘤細(xì)胞系 血細(xì)胞瘤細(xì)胞系,Ramos細(xì)胞 倉鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11

AR42J(大鼠胰腺外分泌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CXADR Others Human 人 CXADR / CAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
OPCML Others Mouse 小鼠 OBCAM / OPCML 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)

CL-0117HT-1080(人纖維肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

CoC1/DDP細(xì)胞，CoC1細(xì)胞耐藥亞株 分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞,BB7.2細(xì)胞 615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株;L7712

AtT-20(小鼠垂體瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CTSZ Others Mouse 小鼠 CTSX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血紅素氧合酶1(HO-1)免疫試劑盒 Human heme oxygenase 1,HO-1 ELISA Kit

人抗核仁抗體(ANA)ELISA試劑盒 ，英文名： ANA ELISA Kit

RatInterleukin1receptorantagonist,IL-1raELISA試劑盒大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanglialcellline-derivedneurotrophicfactor,GDNFELISA試劑盒人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanInterleukin1βconvertingenzyme,ICEELISAKit人白介素1β轉(zhuǎn)換酶(ICE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠高敏*狀腺原酸(u-T3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human eosinophil chemotactic protein Eotaxin 2 (Eotaxin 2/CCL24) ELISA Kit 人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA試劑盒

Humanβ2-glycoprotein1antibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISAKit 人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humananti-thymocyteglobulin,ATGELISA試劑盒人抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次

Humantransthyretin,TTRELISAKit人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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