當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞染色>> Hoechst33258染色液100T免費代測
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更新時間:2017-07-06 09:10:08瀏覽次數(shù):126次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
Hoechst33258染色液100T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Hoechst33258染色液100T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Hoechst33258染色液100T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
HCT-15(人結(jié)腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2
非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-
ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細胞裂解液 (陽性對照)
CW-2細胞,人結(jié)腸癌細胞 人黑色素瘤細胞,A875細胞 人急性早幼粒白血病細胞;HL-60
人胚胎腸粘膜組織來源細胞;CCC-HIE-2
APCS Others Mouse 小鼠 APCS / SAP 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0103Hep G2(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2
IgG2a Others Mouse 小鼠 IgG2a-Fc 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠肝竇內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
RAG小鼠腎腺癌細胞 RAG mice renal adenocarcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS
LIF Protein Mouse 重組小鼠 LIF 蛋白 (Fc 標簽)
RTE(大鼠氣管上皮細胞) 5×106cells/瓶×2 A375(人類惡性黑色素瘤)
CD274 Others Rat 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照)
人表皮黑色素細胞-淺色素cDNAHEM-l cDNA
小鼠樹突狀細胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFP
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-B5 I型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL
Saos-2,人成骨肉瘤細胞 Human
TREM2 Others Mouse 小鼠 TREM2 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒 ,英文名: sICAM-1 ELISA Kit
人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA檢測試劑盒HumanVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2ELISAkit 96T/48T
鳥類催乳素(PRL/LTH)免疫試劑盒 Avian Prolactin/Luteotropic Hormone,PRL/LTH ELISA Kit
CLIAKitforOPGELISAKit大鼠骨保護素規(guī)格:48T/96T
糖化血清白蛋白(GSP)酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitIFN-ω人ω干擾素規(guī)格:48T/96T
小鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human triggering receptor expressed on myeloid cells -1 (TREM-1) ELISA Kit 人髓系細胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒
HumanChlamydiatrachomatis,CISAKit 人沙眼衣原體抗體(CT)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanargininevasopressin,AVPELISA試劑盒人*加壓素(AVP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物源性食品花生(peanut)基因檢測試劑盒20次
Humanthymus-leukemiaantigen,TLaELISAKit人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Hoechst33258染色液100T免費代測兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔細胞間粘附分子1(ICAM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔銅藍蛋白(CP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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