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更新時(shí)間:2017-07-06 09:44:37瀏覽次數(shù):152次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)細(xì)胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實(shí)驗(yàn)方法
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天青石藍(lán)蘇木素染色試劑盒2X50ml使用說(shuō)明書使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
天青石藍(lán)蘇木素染色試劑盒2X50ml使用說(shuō)明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
天青石藍(lán)蘇木素染色試劑盒2X50ml使用說(shuō)明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
PIEC(豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 ) 5×106cells/瓶×2
獼猴皮膚細(xì)胞;MMS7
TSPAN8 Others Human 人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
NCI-H460細(xì)胞,人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化),PC-12細(xì)胞 CM-R007大鼠支氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠雪旺細(xì)胞RSC
Promocell C-28025 Endothelial Progenitor Medium, 內(nèi)皮祖細(xì)胞培養(yǎng)基(即用型) 100ml
人心肌細(xì)胞-RNAHCM-a miRNA5 μg
HEPACAM2 Others Rat 大鼠 HepaCAM2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人心肌成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
PC-12細(xì)胞,大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化) HT-29(結(jié)腸癌細(xì)胞) 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B
CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF1b 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
SVEC4-10(小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
MS4A1 Others Ferret 雪貂 CD20 / MS4A-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人肝細(xì)胞;HL-7702[L-02]
NCI-H460 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞
COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細(xì)胞
人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞
人胚腎細(xì)胞;2V6.11 人胰腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠Mdm2小鼠p53結(jié)合蛋白同源物(MDM2)ELISA試劑盒 ,英文名: MDM2 ELISA Kit
人心鈉肽(ANP)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAtrialNatriureticPeptide,ANPELISAKit 96T/48T
大鼠骨織素(Ostn)免疫試劑盒 Rat osteocrin,Ostn ELISA Kit
CLIAKitfor大鼠Smad1ELISAKit大鼠Smad1規(guī)格:48T/96T
磷脂酰*PS(phosphatidylserine)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitIg-j*j鏈規(guī)格:48T/96T
小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat lactoferrin / lactoferrin (LF/LTF) ELISA Kit 大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒
HumanBonemorphogeneticprotein7,BMP-7ELISAKit 人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumancardiacisoformofTropninT,cELISA試劑盒人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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HumanSolubleClusterofdifferentiation30ligand,sCD30LELISAKit人可溶性CD30配體(sCD30L)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
天青石藍(lán)蘇木素染色試劑盒2X50ml使用說(shuō)明書人胃泌素釋放多肽(GRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胃泌素(Gastrin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*原C(PG-C)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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