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脂褐素染色試劑盒(醛品紅法)3×50ml實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間:2017-07-06 09:48:56瀏覽次數(shù):163次

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脂褐素染色試劑盒(醛品紅法)3×50ml實(shí)驗(yàn)方法公司供應(yīng)的細(xì)胞生物學(xué)試劑品種齊全,質(zhì)量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購(gòu)!

脂褐素染色試劑盒(醛品紅法)3×50ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
脂褐素染色試劑盒(醛品紅法)3×50ml實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
RH-35(大鼠肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

白牦牛皮膚細(xì)胞;Yak-2

CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

NCI-H596細(xì)胞,人肺腺鱗癌細(xì)胞 小鼠Mo-MuLv感染的3T3細(xì)胞,Mo-MuLV/3T3細(xì)胞 CM-R079大鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人前列腺成纖維細(xì)胞HPrF

Gibco 12678017 LHC-8 MEDIUM 500 ml
小鼠紋狀體神經(jīng)元MN-s

HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM3 / HAVCR2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5

DMS153細(xì)胞,人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞,PC12細(xì)胞 CM-H127人晶狀體上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

PANC-1(人胰腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-28020 Hematopoietic ProgenitorMedium, 造血祖細(xì)胞培養(yǎng)基(即用型) 100ml
TLK1 Others Human TLK1 / PKU-beta 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人肝臟間充質(zhì)干細(xì)胞HMSC-hp

VERO細(xì)胞衍生株;SVP

CGM1細(xì)胞,EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,LS174T細(xì)胞 CM-R029大鼠腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

正常大鼠腎細(xì)胞;NRK-52E

CD70 Others Human CD70 / CD27L / TNFSF7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)免疫試劑盒 Human CMLC-1 ELISA Kit

還原型*(GSH)測(cè)試盒 可見分光光度法 50/48

Ratmatrixmetalloproteinase3,MMP-3ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanHemoglobinC,HbCELISA試劑盒人血紅蛋白C(HbC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanLipopolysaccharides,LPSELISAKit人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat neuropeptide Y (NP-Y) ELISA Kit 大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒

Humantartrate-resistantacidphosphatase5b,TRACP-5bELISAKit 人抗酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCaspase3,Casp-3ELISA試劑盒人胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

轉(zhuǎn)基因棉花MON88913品系基因檢測(cè)試劑盒20

humansinglestrandedDNAAntibody,ssDNAELISAKit人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
脂褐素染色試劑盒(醛品紅法)3×50ml實(shí)驗(yàn)方法人天青殺素(AZU)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人天門冬酸轉(zhuǎn)酶/谷草轉(zhuǎn)酶(GOT/GPT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人天門冬酸基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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