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更新時間:2017-07-06 10:06:02瀏覽次數(shù):760次
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孔雀石綠水溶液(1%)100ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
孔雀石綠水溶液(1%)100ml使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
孔雀石綠水溶液(1%)100ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
THP-1(人髓系白血病單核細胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠單核巨噬細胞;J774A.1
CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人細胞裂解液 (陽性對照)
973細胞,人肺癌細胞 小鼠成骨細胞系,MC3T3-E1細胞 CL-0138Lec1(倉鼠卵巢細胞)5×106cells/瓶×2
尿道上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
NHDF-c adult 正常人皮膚成纖維細胞(NHDF)來自成年捐獻者 500,000cells 成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CM-M040小鼠肝竇內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
卵巢上皮細胞培養(yǎng)基OEpiCM
MRC-5細胞,人正常胚肺成纖維細胞 人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞(腦轉(zhuǎn)移),KP-N-NS細胞 人脈絡(luò)叢成纖維細胞HCPF
豬細胞;ST
PDCD1LG2 Others Human 人 PD-L2 / B7-DC / CD273 人細胞裂解液 (陽性對照)
TNFRSF11A Others Rat 大鼠 TNFRSF11A 人細胞裂解液 (陽性對照)
人滑膜細胞cDNAHS cDNA
人內(nèi)臟脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL
RLE-6TN細胞,大鼠肺上皮Ⅱ型細胞 PC-3(人前列腺癌細胞) 大鼠肝細胞;BRL 3A
EFNB2 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
16HBE(人支氣管上皮樣細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH3
大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人纖維母細胞生長因子受體1癌基因伴侶(FGFR1OP)免疫試劑盒 Human FGFR1 oncogene partner,FGFR1OP ELISA kit
蛋白質(zhì)羰基測試盒 紫外分光光度法 50管/24樣
Ratmyeloperoxidase,MPOELISA試劑盒大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanhepatitisEvirusIgG,HEV-IgGELISA試劑盒人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlupusanticoagulant,LAC/LAELISAKit人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat myeloperoxidase (MPO) ELISA Kit 大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒
HumanProstaglandinF2α,PGF2αELISAKit 人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanc-junELISA試劑盒人c-junELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組蛋白賴氨酸特異性脫甲基酶1(LYSINESPECIFICDEMETHYLASE-1;LSD-1)活性熒光定量檢測試劑盒
HumanRotavirus,RVIgMELISAKit人輪狀病毒(RV)IgMELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
孔雀石綠水溶液(1%)100ml使用說明書人羥脯酸(Hyp)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人強啡肽(Dyn)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人前胰淀粉樣蛋白(proIAPP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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