抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)檢測試劑盒120T免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)檢測試劑盒120T免費(fèi)代測操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)檢測試劑盒120T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
NCI-H157(人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

支氣管成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

FZD4 Others Rat 大鼠 Frizzled-4 / FZD4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

Daudi細(xì)胞，人白血病細(xì)胞 小鼠腎足細(xì)胞,Mouse podocyte細(xì)胞 骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基SkMCM-prf

CM-H024人胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

BEL-7404(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M006小鼠肺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2
CL-0034BHK-21(倉鼠腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

FCGR3A Others Human 人 CD16a / FCGR3A CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

磷酸鹽緩沖注DPBS

大額牛皮膚細(xì)胞;BFR-S3 非洲綠猴腎細(xì)胞，VERO細(xì)胞 PC-3(前列腺癌細(xì)胞)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM9401

THY1 Others Mouse 小鼠 THY1 / CD90 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
DDR2 Others Human 人 DDR2 Kinase / CD167b (aa 422-855) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17

CL-0355HFT-8810(人胎兒胸腺細(xì)胞株)5×106cells/瓶×2

CHO, 中國倉鼠卵巢細(xì)胞系 人T細(xì)胞淋巴瘤，Jurkat E6-1細(xì)胞 THLE-3(人肝上皮細(xì)胞)

人胰腺癌細(xì)胞;AsPC-1

VSIG4 Others Mouse 小鼠 VSIG4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員11A(TNFRSF11A/RANK)ELISA試劑盒 ，英文名： TNFRSF11A/RANK ELISA Kit

人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測試劑盒Humanmicrotransferrinuria,MTFELISAKit 96T/48T

大鼠不對(duì)稱二甲基*(ADMA)免疫試劑盒 Rat asymmetrical dimethylarginine,ADMA ELISA Kit

CLIAKitforTNF-Alpha(HumanTumornecrosisfactorAlpha)ELISAKIT人腫瘤壞死因子α規(guī)格：48T/96T

全組織肌腺苷酸脫氨酶(Myoadenylatedeaminase)活性染色試劑盒10次

ELISAKitanti-cartilage-Ab人抗軟骨抗體規(guī)格：48T/96T
兔子*Ⅱ(FⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human adenosine three phosphate binding cassette transporter A1 (ABCA1) ELISA Kit 人腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)ELISA試劑盒

Humantrypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 人*原激活肽(TAP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanDopamineD1receptor,D1RELISA試劑盒人多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織NAD依賴性甘油醛-3-磷酸脫氫酶(NAD-Glyceraldehyde-3-PhosphateDehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光譜法定量檢測試劑盒20次

Humanphospho-extracellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit人磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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