當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞氧化應(yīng)激>> 5′-核苷酸酶(5′-NT)檢測試劑盒100T實驗方法
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更新時間:2017-07-07 12:46:34瀏覽次數(shù):162次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)5′-核苷酸酶(5′-NT)檢測試劑盒100T實驗方法NCI-H446(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
視網(wǎng)膜muller細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
TF Others Mouse 小鼠 Transferrin / CD176 / Serotransferrin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
KU812細(xì)胞,人外周血嗜堿性白細(xì)胞 615小鼠癌瘤株,Ca763細(xì)胞 MTT細(xì)胞活力和增殖檢測試劑盒MTT
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S2
C-33 A(人子細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 T-107B*(含100mL酶解緩沖液)10mL 人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30
5′-核苷酸酶(5′-NT)檢測試劑盒100T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
5′-核苷酸酶(5′-NT)檢測試劑盒100T實驗方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
5′-核苷酸酶(5′-NT)檢測試劑盒100T實驗方法實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CL-0082F9(小鼠畸胎瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A (167 His) CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
MelanoFectagen? 黑色素細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒
牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1) 人胃癌細(xì)胞,NCI-N87細(xì)胞 NS-1細(xì)胞,小鼠骨髓瘤細(xì)胞
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(彝族);KM934
SLAMF7 Others Human 人 SLAMF7 / CRACC / CD319 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
LSAMP Others Human 人 LSAMP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]
HEC-1-A 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
Caki-1人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞 Caki-1 in human renal clear cell carcinoma of skin metastasis cell McCOY's 5A+10%FBS
TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
大鼠神經(jīng)黑質(zhì)細(xì)胞(RNsn)(1×106) BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細(xì)胞株 Human
小鼠酸脫氫酶β(PDHβ)ELISA試劑盒 ,英文名: PDHβ ELISA Kit
人晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA檢測試劑盒Humanadvancedoxidationproteinproducts,AOPPELISAKit 96T/48T
大鼠可溶性糖蛋白VI(sGPVI)免疫試劑盒 Rat Soluble Glycoprotein VI,SGPVI ELISA KIT
英文名稱RatproteinkinaseBELISAKit大鼠蛋白激酶B(PKB)規(guī)格:96T/48T
經(jīng)典水相封片液10毫升
ELISAKitGTE-AGE人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物規(guī)格:48T/96T
兔子可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human cardiac specific troponin T (c) ELISA Kit 人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒
Humananti-deoxyribonucleaseB,anti-DNaseBELISAKit 人抗DNA酶B抗體(anti-DNaseB)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
humanEchoVirusIgM,ECHOIgMELISA試劑盒人艾柯病毒IgM(ECHOIgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織PDGFRα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanPeptidylprolylcis/transisomerase,PPIELISAKit人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5′-核苷酸酶(5′-NT)檢測試劑盒100T實驗方法人成骨生長肽(OGP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人超敏生長激素(US-GH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人超敏前列腺特異性抗原(PSA-US)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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