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植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法

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植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類(lèi)推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線(xiàn)粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線(xiàn)粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
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ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

人支氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

F11R Others Rat 大鼠 JAM-A / F11R 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

D407細(xì)胞,人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 出芽短梗霉 人急性T淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞;I 2.1(CRL-2572)

水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S1

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維 5×106cells/瓶×2 小鼠 AMICA1 / JAML 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人心臟成纖維細(xì)胞-心房HCF-aa

EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化);PC-12(高分化) 肺扁平上皮癌細(xì)胞,QG-56細(xì)胞 E14細(xì)胞,129小鼠ES細(xì)胞

KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 Human

CLEC4D Others Human CLEC4D / CLECSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
SERPINB6B Others Mouse 小鼠 Serpinb6b 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人絨毛間葉成纖維細(xì)胞RNAHVMF miRNA5 μg

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7

CW-2細(xì)胞,結(jié)腸腺癌細(xì)胞 皮膚T細(xì)胞淋巴瘤,Hut-78細(xì)胞 人成骨肉瘤細(xì)胞;MG-63

615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性白血病瘤株;L615

DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠膽囊收縮素八肽(CCK8)ELISA試劑盒 ,英文名: CCK8 ELISA Kit

人糖化蛋白(GSP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanglycosylatedserumprotein,GSPELISAKit 96T/48T

大鼠內(nèi)毒素(ET)免疫試劑盒 Rat endotoxin,ET ELISA Kit

英文名稱(chēng)RatActininαELISAKit大鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α(Actininα)規(guī)格:96T/48T

酵母菌YNB培養(yǎng)基100/500毫升

ELISAKitPLAP人胎盤(pán)堿性磷酸酶規(guī)格:48T/96T
兔血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat folic acid (FA) ELISA Kit 大鼠*(FA)ELISA試劑盒

Humanepstein-barrvirusIgA,EBvIgAELISAKit EB病毒IgA(EBvIgA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanFreeTri-iodothyronineIndes,Free-T3ELISA試劑盒人游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織半*蛋白酶-4(PASE-4)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20

HumanNetrin-4,Ntn4ELISAKit人軸突生長(zhǎng)誘向因子4(Ntn4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法犬白介素18(IL-18)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

犬γ基丁酸(GABA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

犬β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

犬α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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