當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測>> 酵母蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T使用說明書
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更新時間:2017-07-10 09:26:53瀏覽次數(shù):115次
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酵母蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
酵母蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
CCL16 Protein Human 重組人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人前列腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
FAM3D Others Mouse 小鼠 FAM3D / Oit1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
A673細(xì)胞,人橫紋癌細(xì)胞 肺炎鏈球菌 615小鼠狀肺腺癌瘤株;P615
犬腎細(xì)胞;MDCK/IgR
MA-782(小鼠癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
神經(jīng)元細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
EPDR1 Others Human 人 EPDR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);DG6-GFP
HPAEpiC細(xì)胞,人肺泡上皮細(xì)胞 小鼠腎小球系膜細(xì)胞,MES-13細(xì)胞 CL-0090Hacat(人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
T-24(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HPMEC-c 人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HPMEC) 500,000cells 腦動脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
KLK3 Others Human 人 KLK3 / PSA / Kallikrein-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人癌細(xì)胞;MDA-MB-231
MT-4 人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞
A-673 人橫紋肌瘤細(xì)胞 A-673 rhabdomyoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS
TDGF1 Protein Human 重組人 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC 人胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠谷酰胺合成酶(GS)ELISA試劑盒 ,英文名: GS ELISA Kit
人碳酸酐酶2(CA-2)ELISA檢測試劑盒Humancarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit 96T/48T
大鼠*結(jié)合蛋白4(RBP-4)免疫試劑盒 Rat Retinol binding protein 4,RBP-4 ELISA Kit
英文名稱Ratheatshockprotein60ELISAKit大鼠熱休克蛋白60(Hsp60)規(guī)格:96T/48T
活化*9(FACTORIXa)活性比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitcTn-Ⅰ人心肌肌鈣蛋白Ⅰ規(guī)格:48T/96T
兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human plaet associated antibody IgM (PA-IgM) ELISA Kit 人血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)ELISA試劑盒
HumanCysticercosisantybody,CYTAbELISAKit 人囊蟲病抗體(CYTAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humangastrincellantibody,GCAELISA試劑盒人胃泌素細(xì)胞抗體(GCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織半*蛋白酶-9(PASE-9)活性熒光定量檢測試劑盒20次
HumanN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit人N-乙?;?/span>-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-*(AcSDKP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酵母蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T使用說明書牛免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛磷酸烯醇式丙酸羧激酶(PCK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛磷酸果糖激酶(PFK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛淋巴細(xì)胞因子ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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