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昆蟲蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)50T使用說明書

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更新時間:2017-07-10 09:32:47瀏覽次數(shù):108次

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昆蟲蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)50T使用說明書注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
昆蟲蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)50T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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XCL1 Protein Canine 重組狗 XCL1 蛋白 (His 標簽)

人淋巴成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL

EPHB6 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB6 / EphB6 人細胞裂解液 (陽性對照)

HS-4細胞,人皮膚癌細胞系 鼠傷*Ta97 雜交瘤(B);Z172A4C4C6F3G12

敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21

ME-180(人子宮頸表皮癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IL1RL1 / ST2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人肝永生化細胞;THLE-3

ENTPD2 Others Human NTPDase 2 / ENTPD2 (aa 29-460) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0388NCI-H157(人非小細胞肺腺癌細胞)5×106cells/瓶×2

C2C12, 小鼠肌原細胞 人前列腺癌細胞,DU145細胞 SK-MES-1(人肺癌細胞)

人肺巨細胞癌低轉(zhuǎn)移細胞株;PG-LH7

CPM Others Human CPM / Carboxypeptidase M 人細胞裂解液 (陽性對照)
AGO3 Others Human AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人成纖維細胞裂解物HMFL

小鼠正常肝細胞;NCTC 1469 [NCTC1469]

MDA-MB-453細胞,癌細胞 人食管鱗癌,KYSE 450細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-D2

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)ELISA試劑盒 ,英文名: vWA3A ELISA Kit

人肽聚糖(PG)ELISA檢測試劑盒Humanpeptidoglycan,PGELISAKit 96T/48T

大鼠透明質(zhì)酸酶1(HYAL1)免疫試劑盒 Rat Hyaluronidase-1,HYAL1 ELISA kit

英文名稱RatGlycogenphosphorylaseBBELISAKit大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GPBB)規(guī)格:96T/48T

化學(xué)發(fā)光分析20樣本

ELISAKitVEGFR-1人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1規(guī)格:48T/96T
兔*型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat insulin like growth factor binding protein 3 (IGFBP-3) ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒

humancolicinELISAKit 人大腸菌素(colicin)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanglialcellline-derivedneurotrophicfactor,GDNFELISA試劑盒人膠質(zhì)細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織長鏈烯脂酰輔酶A水合酶(ENOYLCOAHYDRATASE)活性比色法定量檢測試劑盒20

Humanmyogenin,MYOGELISAKit人肌細胞生成素(MYOG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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綿羊胰島素(InsulinELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

綿羊血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGFELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

綿羊褪黑素(MT/MLTELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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