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昆蟲核蛋白/胞漿蛋白提取試劑盒50T實驗方法

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更新時間:2017-07-10 09:33:19瀏覽次數(shù):136次

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公司供應(yīng)的昆蟲核蛋白/胞漿蛋白提取試劑盒50T實驗方法品種類齊全,檢測效果好,質(zhì)量保證,歡迎廣大科研用戶!

昆蟲核蛋白/胞漿蛋白提取試劑盒50T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
昆蟲核蛋白/胞漿蛋白提取試劑盒50T實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
昆蟲核蛋白/胞漿蛋白提取試劑盒50T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer
CX3CL1 Protein Canine 重組狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標簽)

人臍帶單核細胞*培養(yǎng)基 100mL

SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人細胞裂解液 (陽性對照)

143TK細胞,人胸腺激酶缺陷性細胞系 鼠傷*Ta100 大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-1

APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細胞株;7WCY1.0

MG-63(人骨肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CD320 / 8D6A 人細胞裂解液 (陽性對照)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0910

ENPP7 Others Mouse 小鼠 ENPP7 / NPP-7 人細胞裂解液 (陽性對照)

MV3 人黑色素瘤細胞

MG-63人骨肉瘤細胞 Human osteosarcoma cell line MG-63 MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%優(yōu)質(zhì)熱滅活FBS

DKK1 Protein Rhesus 重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, Fc 標簽)

人胚肺成纖維細胞;HFL1 人淋巴成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
LIF Others Mouse 小鼠 LIF 人細胞裂解液 (陽性對照)

人導(dǎo)管癌細胞;HCC38

COLO 205 人結(jié)腸癌細胞

U-2 OS-EGFP+puro人骨肉瘤細胞 U-2 human osteosarcoma cell line OS-EGFP+puro McCoy's 5A+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin

CD40LG Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)

人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞 (HREC)( 5×105 ) HBE, 正常人支氣管上皮細胞系 Human
小鼠脫氫酶(XDH)ELISA試劑盒 ,英文名: XDH ELISA Kit

人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPI)ELISA檢測試劑盒HumanPeptidylprolylcis/transisomerase,PPIELISAKit 96T/48T

大鼠*(PG)免疫試劑盒 Rat Pepsin,PG ELISA Kit

英文名稱RatCyclinD2ELISAKit大鼠細胞周期素D2(CyclinD2)規(guī)格:96T/48T

核酸氧化8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20

ELISAKitCH50人血清總補體規(guī)格:48T/96T
兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat insulin like growth factor binding protein 4 (IGFBP-4) ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒

HumanRotavirusantigen,RVAgELISAKit 人輪狀病毒抗原(RVAg)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISA試劑盒人*酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織長鏈脂酰輔酶A脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試劑盒20

HumanMyeloidProgenitorInhibitoryFactor1,MPIF-1ELISAKit人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
昆蟲核蛋白/胞漿蛋白提取試劑盒50T實驗方法綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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