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更新時間:2017-07-10 10:03:49瀏覽次數(shù):145次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)PAGE連續(xù)凝膠電泳緩沖液(2×,PH8.9)500ml免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
PAGE連續(xù)凝膠電泳緩沖液(2×,PH8.9)500ml免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
PAGE連續(xù)凝膠電泳緩沖液(2×,PH8.9)500ml免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CXCL1 Protein Human 重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & SUMO 標簽)
人膀胱上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
IL1RN Others Rat 大鼠 IL-1RA / IL1RN 人細胞裂解液 (陽性對照)
H22細胞,小鼠肝癌細胞 Neuro-2A(腦神經(jīng)瘤細胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0909
人胚腎細胞;2V6.11
SK-BR-3(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 狗 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-M044小鼠結(jié)腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
DSC2 Others Rat 大鼠 DSC2 / Desmocollin-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
角質(zhì)細胞培養(yǎng)基KM-acf
HCE1細胞,細胞 小鼠紅白血病細胞,MEL細胞 人腦血管外膜成纖維細胞HBVSMC
Hela S3(人細胞) 5×106cells/瓶×2
hMNC-PB single donor Pellet 人類外周血單核細胞團塊單一捐獻者,超純 > 1 mio.cells 人羊膜上皮細胞總RNAHAmEpiC tRNA
ADK Others Human 人 ADK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人腎系膜細胞RNAHRMC miRNA5 μg
水貂肺上皮細胞;Mv.1.Lu(NBL-7)
SHG-44細胞,膠質(zhì)瘤細胞 NCTC克隆929細胞,L129細胞 人T淋巴瘤細胞Jurkat亞系;Jurkat77
C57小鼠黑色素瘤瘤株;ME (Me)
EFNB1 Others Human 人 EphrinB1 / EFNB1 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠*Ⅻ(FⅫ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進化枝3G(Serpina3g)免疫試劑盒 human serine/cysteine peptidase inhibitor clade A member 3G,Serpina3g ELISA Kit
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISA試劑盒大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanluteotropichormone,LHELISA試劑盒*(LH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanpapillomavirusIgM,HPV-IgMELISAKit人狀瘤病毒抗體IgM(HPV-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
山羊雌三醇(E3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human pancreatic cancer marker CA242ELISA Kit 人胰腺癌標志物CA242ELISA試劑盒
Humanα-glutathioneS-transferases,α-GSISAKit 人α*S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor,GDIELISA試劑盒人鳥苷酸解離抑制因子(GDI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織*(proline)含量比色法定量檢測試劑盒20次
humanMAXdimerizationprotein1,mxd1ELISAKit人MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PAGE連續(xù)凝膠電泳緩沖液(2×,PH8.9)500ml免費代測大鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠乙酰*轉(zhuǎn)移酶(CHAT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠乙酰*酯酶(AChE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠乙酰*受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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