PAGE不連續(xù)凝膠電泳緩沖液(5×)500ml實(shí)驗(yàn)方法CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

IL1R2 Others Mouse 小鼠 IL1R2 / CD121b 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

RH-35細(xì)胞，大鼠肝癌細(xì)胞 HeLa(細(xì)胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1036

人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]

SK-MES-1(人肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Alpha 1 Antitrypsin / SerpinA1a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

PAGE不連續(xù)凝膠電泳緩沖液(5×)500ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
PAGE不連續(xù)凝膠電泳緩沖液(5×)500ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀(guān)察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀(guān)察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀(guān)察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
PAGE不連續(xù)凝膠電泳緩沖液(5×)500ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
CM-H127人晶狀體上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

DPYS Others Human 人 DPYS / Dihydropyrimidinase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人軟骨細(xì)胞HC-a

羅猴胎腎細(xì)胞;MA104 腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞，C6細(xì)胞 NCI-H446 [H446](小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)

人前列腺癌細(xì)胞;DU 145 [DU145;DU-145]

TNFRSF14 Others Mouse 小鼠 HVEM / TNFRSF14 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
ACO2 Others Human 人 ACO2 / Aconitase 2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人腎小管上皮細(xì)胞;HKC

長(zhǎng)尾綠猴胚胎細(xì)胞;4179

786-O[786-0]細(xì)胞，腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 單核細(xì)胞白血病細(xì)胞,J-111細(xì)胞 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H209

KM小鼠子瘤株;U27

CD86 Others Human 人 CD86 / B7-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠核受體亞家族3C組成員1(NR3C1)ELISA試劑盒 ，英文名： NR3C1 ELISA Kit

人*蛋白酶(PRSS)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanserineprotease,PRSSELISAKit 96T/48T

大鼠脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)免疫試劑盒 Rat Dehydroepiandrosterone sulfate,DHEA-S ELISA Kit

英文名稱(chēng)RatHCYELISAKit大鼠同型半胱氨(HCY)規(guī)格：96T/48T

呼吸鏈依賴(lài)性純化線(xiàn)粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級(jí)熒光測(cè)定試劑盒20次

ELISAKitANG-2人血管生成素2規(guī)格：48T/96T
山羊檢測(cè)(e)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human pancreatic inhibin (Pancreastatin) ELISA Kit 人胰抑制素(Pancreastatin)ELISA試劑盒

HumanhepatitisBvirusXAg,HBxAgELISAKit 人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanHaptoglobin,Hpt/HPELISA試劑盒人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織*肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Humanmaturationpromotingfactor,MF/MPFELISAKit人促有絲分裂因子(MF/MPF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
PAGE不連續(xù)凝膠電泳緩沖液(5×)500ml實(shí)驗(yàn)方法大鼠*肽（Glp-1）ELISA試劑盒         組裝/原裝

大鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝