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血液蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T使用說明書

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更新時間:2017-07-10 10:18:17瀏覽次數(shù):162次

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血液蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
血液蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
血液蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T使用說明書實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer
EFNA5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標(biāo)簽)

胎兒真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

EDA2R Others Rat 大鼠 XEDAR / EDA2R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CFSC-3H & 5H細(xì)胞,大鼠肝星形細(xì)胞 SK-N-SH(神經(jīng)母細(xì)胞瘤) 大鼠垂體瘤細(xì)胞;GH3

人絨毛間葉成纖維細(xì)胞cDNAHVMF cDNA

YAC-1(小鼠淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠肺腺癌細(xì)胞系;LA795
人表皮黑色素細(xì)胞-HEM-a

DAPK1 Others Human DAPK1 / DAP Kinase 1 (aa 1-363) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCBBF

Y1細(xì)胞,腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 人胰腺癌細(xì)胞,MIApaca-2細(xì)胞 CM-M008小鼠支氣管成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

大鼠骨肉瘤細(xì)胞;UMR-106

CDH4 Others Human R-Cadherin / CDH4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
NOV Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells Transfected Lysate (positive control) (denatured)

人無色素睫狀上皮細(xì)胞HNPCEpiC

恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化);PC-12(低分化) 肝癌細(xì)胞,BEL-7402細(xì)胞 D3細(xì)胞,129小鼠ES細(xì)胞

MiaPaCa-2, 人胰腺癌細(xì)胞 Human

CST4 Others Human CST4 / Cystatin-4 / Cystatin-S 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人瘦素(LEP)免疫試劑盒 Human Leptin,LEP ELISA kit

Mouseferritin,FEELISAKit小鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Ratα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISA試劑盒大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISA試劑盒人巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanPeptidylprolylcis/transisomerase,PPIELISAKit人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human euglobulinlysis (EL) ELISA Kit 人優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒

Humanlowmolecularweightheparin,LMWHELISAKit 人低分子肝素(LMWH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

humanhepatitisBvirus,HBVpreS2AgELISA試劑盒人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBVpreS2Ag)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織*(GLUTATHIONE)總濃度熒光定量檢測試劑盒50

HumanMacrophageInflammatoryProtein-1β,MIP-1βELISAKit人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
血液蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T使用說明書大鼠生長因子(GH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠*(SS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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