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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
乳清蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
乳清蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
表皮生長因子
大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
TNFSF9 Others Rat 大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
A9細(xì)胞,小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 HCC1428(人癌細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-C
星形細(xì)胞生長添加物SteCGS
Ishikawa(人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 滑膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
腦膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CSNK2A1 Others Human 人 CSNK2A1 / CK2A1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7
CHO/dhFr-細(xì)胞,中國倉鼠二氫*還原酶缺陷細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞,HuH-7細(xì)胞 CL-0144LoVo(人大腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中國倉鼠肺細(xì)胞;V79
AXL Others Mouse 小鼠 Axl Kinase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
IL1RL1 Others Human 人 IL1RL1 / ST2 ( isoform A ) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人心臟成纖維細(xì)胞cDNAHCF cDNA
4179 長尾綠猴胚胎細(xì)胞
CL-0271D283 Med(人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞
人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株(HEK293);APP-PS1 人支持細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人生長激素(GH)免疫試劑盒 Human growth hormone,HGH ELISA KIT
MouseGastrointestinalcancerMarker-CA199ELISAKit小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
SheepInterleukin2,IL-2ELISA試劑盒綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanmastcelltryptase,MCISA試劑盒人肥大細(xì)胞類*(MCT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanphosphofructokinase-plaet,PFKPELISAKit人血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human lipoprotein lipase (LPL) ELISA Kit 人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒
HumanHistoneDeacetylase,HDELISAKit 人組織蛋白去乙?;?/span>(HD)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanHyaluronidase,HAaseELISA試劑盒人透明質(zhì)酸酶(HAase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織肌酐(CREATININE)酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次
Humanlipoteichoicacids,LTAELISAKit人脂磷壁酸(LTA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乳清蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抗IVIgG抗體ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
我司乳清蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
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