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高爾基體蛋白提取試劑盒100T實驗方法

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更新時間:2017-07-10 11:52:59瀏覽次數(shù):190次

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高爾基體蛋白提取試劑盒100T實驗方法NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標簽)

大鼠氣管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL

CA9 Others Canine Carbonic Anhydrase IX / CA9 人細胞裂解液 (陽性對照)

F81細胞,貓腎細胞 NCI-H838 [H838](人肺癌細胞) 散鱗鏡鯉尾鰭細胞;YZ21

神經(jīng)元生長添加物NGS

MA-891(小鼠癌高轉(zhuǎn)移細胞) 5×106cells/瓶×2 腦成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

高爾基體蛋白提取試劑盒100T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
高爾基體蛋白提取試劑盒100T實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
高爾基體蛋白提取試劑盒100T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer。
兔主動脈平滑肌細胞;SMC

CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

臍動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

蚊子幼蟲體細胞;Aedes albopictus clone C6/36 人肺癌細胞,NCI-H1299細胞 A-431(表皮癌細胞)

人低分化肺腺癌細胞;GLC-82 [GLC82]

ENG Others Human Endoglin / CD105 / ENG 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠腎臟管狀上皮細胞(RRTEpiC)(5×105)

人心臟成纖維細胞-心室RNAHCF-av miRNA5 μg

水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S1

艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich 小鼠腎小管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL

人羊膜上皮細胞 Human

EFNB1 Others Mouse 小鼠 EFNB1 / Ephrin-B1 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人生長分化因子15(GDF15)免疫試劑盒 Human growth differentiation factor 15,GDF15 ELISA Kit

Mouseglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

SheepPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISA試劑盒綿羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanMatrixmetalloproteinase1,MMP-1ELISA試劑盒人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanphosphoinositide-specificphospholipaseC,PIPLCELISAKit人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C(PIPLC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人脂聯(lián)素(ADP/ADPN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human lipase (Lipase) ELISA Kit 人脂肪酶(Lipase)ELISA試劑盒

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Humanhydroxyproline,HypELISA試劑盒人羥*(Hyp)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

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大鼠膠質(zhì)細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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