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RIPA裂解液(2X)50ml使用說明書

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更新時間:2017-07-10 12:19:54瀏覽次數(shù):176次

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公司供應(yīng)的RIPA裂解液(2X)50ml使用說明書品種類齊全,檢測效果好,質(zhì)量保證,歡迎廣大科研用戶!

RIPA裂解液(2X50ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
RIPA裂解液(2X50ml使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
RIPA裂解液(2X50ml使用說明書實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer。
FGF9 Protein Canine 重組狗 FGF9 / FGF-9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

大鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

EPHA4 Others Rat 大鼠 EphA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

HMy2.CIRB淋巴母細(xì)胞 HMy2.CIR human B lymphoblastoid cell IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS

人滑膜細(xì)胞HS

A3(T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 子宮癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml
CL-0212SK-Hep-1(人肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

CREG1 Others Mouse 小鼠 CREG / CREG1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人表皮角質(zhì)細(xì)胞-cDNAHEK-acDNA

MCF/Adr細(xì)胞,人癌*耐藥細(xì)胞株 團(tuán)頭魴尾鰭細(xì)胞,WCF細(xì)胞 骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

2V6.11(人胚腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HCF Pellet 人類心臟成纖維細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HA-h L
CD3D Others Mouse 小鼠 CD3d / CD3 delta 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人羊膜細(xì)胞;WISH

人尿道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

Neuro-2a細(xì)胞,小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞 MDA-MB-231(癌細(xì)胞) 人腦瘤細(xì)胞;SF767

IL8 Protein Human 重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77, Fc 標(biāo)簽)

SP2/0(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 ANTXR2 / CMG2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人神經(jīng)型一氧化氮合成酶(nNOS)免疫試劑盒 Human Neuronal Nitric Oxide Synthase,nNOS ELISA Kit

MouseHaptoglobin,Hpt/HPELISAKit小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

通用型甜菜壞死黃脈病毒(BeetNecroticYellowVeinVirus;BNYVV)基因檢測試劑盒20

Humanmelanocytestimulatinghormone,MSHELISA試劑盒人黑色素細(xì)胞刺激素(MSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanplacentalribonucleaseinhibitor,HPRIELISAKit人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人載脂蛋白C2(Apo-C2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human tumor specific growth factor / tumor associated factor (TSGF) ELISA Kit 人特異生長因子/相關(guān)因子(TSGF)ELISA試劑盒

Humannuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISAKit 人核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humaninhibitorofapoptosis,IAPELISA試劑盒人細(xì)胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-8)活性熒光定量檢測試劑盒20

HumanLegionellapneumophilaantigenLPAgELISAKit人軍團(tuán)菌抗原(LPAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
RIPA裂解液(2X50ml使用說明書大鼠凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠第八因子相關(guān)抗原(FAg)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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