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液體 RNAout50 次操作步驟

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更新時間:2017-07-12 16:23:09瀏覽次數(shù):119次

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液體 RNAout50 次操作步驟RNALOCKER 是一種在較高溫度下保存 RNA 樣品的非凍型無毒溶液,它能 迅速滲入細胞內(nèi),通過高效抑制 RNase 的活性而保存 RNA 的完整性。

液體 RNAout50 次操作步驟特點:
RNALOCKER
是一種在較高溫度下保存 RNA 樣品的非凍型無毒溶液,它能 迅速滲入細胞內(nèi),通過高效抑制 RNase 的活性而保存 RNA 的完整性。
1. 操作簡單,將*薄浸沒在 RNALOCKER 中即可使其 RNA 不被降解。
2. 替代液氮,使樣品的保存不需液氮,干冰或-80冰箱,尤其適用于臨床和 野外樣品的快速和大規(guī)模采集。
3. RNA 完整,因 RNALOCKER 能迅速抑制組織中 RNA 酶的活性,故從中提取 RNA 的質(zhì)量跟液氮保存的樣品相比不相上下。
4. 方便運輸,處理過的樣品能在 25保存一周,使樣品郵寄和運輸變得容易 和便宜,有利學術合作和交流。
5. 反復凍融,經(jīng) RNALOCKER 處理的樣品可反復凍融 20 次,其間可對樣品進 行各種處理而不影響終提取的 RNA 的質(zhì)量。
6. 結(jié)果準確,RNALOCKER 進入細胞十分快速,基因表達在發(fā)生應急改變前就 得以鎖定,故 RNA 分析更能反映取樣時的真況。
7. 可比性強,RNALOCKER 能減少大規(guī)模樣品處理中的誤差,增加各次實驗數(shù) 據(jù)間的可比性,對大規(guī)模基因表達譜的分析尤其有用。
8. 兼容性廣,雖然處理過的樣品可以使用天澤基因的動物 RNAOUT TRIzol 等試劑提取其 RNA,樣品還可直接用于組織切片,免疫學和流式細胞分析而 不影響 RNA 提取的質(zhì)量。
液體 RNAout50 次操作步驟存新鮮組織樣品:
1. 估計*浸沒樣品所需要 RNALOCKER 的體積(1g 組織需 10 mL RNA
2. 標記收集管并加入估計所需量的 RNALOCKER。
3. 以快速度將樣品剪切成厚度小于 0.5 cm 的碎塊。注: 鼠肝、腎和脾等小器官樣品和沒有蠟質(zhì)保護層的植物樣品可不需剪切而直接放入本產(chǎn)品中保存,有蠟質(zhì)保護層的植物樣品需要先將蠟表皮破壞。
液體 RNAout50 次操作步驟病毒:
1.
標記收集管。
2. 將待樣品轉(zhuǎn)移到離心管中,離心收集細胞,棄上清。注:處理含病毒的樣品(如血漿)可直接從步驟 2.4 開始。
3. 用冰浴的緩沖液洗一次。
4. 將細胞懸浮在少量緩沖液中。
5. 加入五到十倍體積的 RNALOCKER,混均; 對病毒樣品,加入兩到三倍體積的 RNALOCKER,混均。
6. 將收集管存放于溫度適當?shù)牡胤剑娣艜r間不能超該溫度下的長存放時間。如果要存放在-20-80,需先在 4放置后再轉(zhuǎn)移到后溫度條件(將樣品轉(zhuǎn)移到-20-80前, 需要倒棄保護液)。注: 樣品存放溫度與其長存放時間關系為如下 37 一天(病毒樣品為一月) 18-25 一周(病毒樣品為一月以上) 2-8 一個月 -20-80 *
7. 取出樣品,室溫下融化(-20-80保存的樣品需先在室溫下融化)。
8. 加入一倍體積的預冷的緩沖液 ( PBS),用常規(guī)離心法收集細胞并用緩沖液洗一次。病毒樣品可免去此步驟。
9. 細胞直接用于 RNA 的提取或其他處理。
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