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MgCl2溶液,25mM,PCR 級(jí)5mL保存

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更新時(shí)間:2017-07-17 12:57:25瀏覽次數(shù):297次

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MgCl2溶液,25mM,PCR 級(jí)5mL保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

MgCl2溶液,25mM,PCR 級(jí)5mL保存產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
MgCl2溶液,25mM,PCR 級(jí)5mL保存變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
MgCl2溶液,25mMPCR 級(jí)5mL保存DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒有必要。
MgCl2溶液,25mMPCR 級(jí)5mL保存詳細(xì)說明書:

MgCl2溶液,25mMPCR 級(jí)5mL保存使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
11-deoxy-16,16-dimethyl Prostaglandin E2 10 mg     9-oxo-15R-hydroxy-16,16-dimethyl-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 11-deoxy-1616-dimethyl PGE2; 11-deoxy-16,16-dimethyl Prostaglandin E2

Nortriptyline hydrochloride 50 mg     Acetexa|Pamelor; 3-10,11-dihydro-5H-dibenzo[a,d]cyclohepten-5-ylidene-N-methyl-1-propanamine, monohydrochloride

水流二氫鉀(100GM     potewwium Phosphate Monobasic Anhydrous, 8--8; 99%

4Z),7Z),10Z),13Z),16Z-Nonadecapentaenoic Acid-d5 1 mg     4Z,7Z,10Z,13Z16Z-nonadeca-4,7,1013,16-pentaenoic-1818’,19,19,19-d5 acid 4Z),7Z),10Z),13Z),16Z-Nonadecapentaenoic Acid-d5

SIN-1 Chloride 50 mg     5-amino-3-4-morpholinyl-1,23-oxadiazolium chloride; 3-Morpholino-sydnonimine|Linsidomine; SIN-1 Chloride

6-[[2-[[2-2S-2-Cya-pyrrolidinyl]-2-oxoethyl]amino]ethyl]amino-3-pyridinecarbononitnile Dihydrochloride     DPP IV Inhibitor, NVP DPP 728
α-hydroxy Farnesyl Phosphonic Acid 5 mg     (±)-1-hydroxy-3,7,11-trimethyl-2E6E,10-dodecatriene-1-phosphonic acid Hydroxyfarnesyl Phosphate; α-hydroxy Farnesyl Phosphonic Acid

NSI-189 1 mg     [2-[3-methylbutylamino]-3-pyridinyl][4-phenylmethyl-1-piperazinyl]-Methanone

Salermide 100 mg     N-[3-[[2-hydroxy-1-naphthalenylmethylene]amino]phenyl]-a-methyl-benzeneacetamide; Salermide

5-fluoro AB-PINACA 50 mg     AB-PINACA 5-fluoro analog; S-N-1-amino-3-methyl-1-oxobutan-2-yl-1-5-fluoropentyl-1H-indazole-3-carboxamide

Bromophenol Blue 50 g     44-1,1-dioxido-3H-2,1-benzoxathiol-3-ylidenebis-2,6-dibromo-phenol; Albutest|NSC 7818; Bromophenol Blue

DiaEasy Dialyzer (20 ml) MWCO 6-8 kDa     DiaEasy Dialyzer (20 ml) MWCO 6-8 kDa
9S-HODE 1 mg     9S-xy7noxy-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9S-HODE

RVX-208 10 mg     2-[4-2-xy7noxyethoxy-3,5-dimetxylpxenyl]-5,7-dimetxoxy-43H-inoneazolinone

Annexin V-mFluor Violet 450偶聯(lián)物     Annexin V-mFluor Violet 450 conjugate

Palmiaidic Acid metxyl ester 1 g     9E-hexadecenoic acid, metxyl ester 9-trans-Hexadecenoic acid metxyl ester; Palmiaidic Acid metxyl ester

γ-Linolenic Acid 250 mg     6Z9Z,12Z-octadecatrienoic acid GLA; γ-Linolenic Acid

Ophtalmokalixan     Kanamycin Sulfate USP
NBB培養(yǎng)基250g用于啤酒中厭氧菌檢測(cè)

乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基 Lactobacillus broth Medium 用于乳酸桿菌增菌培養(yǎng)

EYA培養(yǎng)基基礎(chǔ) Egg Yolk Agar Medium Base 250 肉毒梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)

碎肉培養(yǎng)基250g/瓶用于痤瘡丙酸桿菌的培養(yǎng),不含維生素K,需添加(庖肉牛肉粒)incubationmedia碎肉培養(yǎng)基250g/瓶用于痤瘡丙酸桿菌的培養(yǎng),不含維生素K,需添加(庖肉牛肉粒)

THBMedium
一級(jí)目錄:顯色培養(yǎng)基二級(jí)目錄:顯色培養(yǎng)基

5L incubation media 5L

李克犁頭霉或傘枝梨頭霉 獸用消毒劑指標(biāo)菌 /

雙料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基管(含小倒管)20/包用于大腸菌群的測(cè)定

ColumbiaAgarMedium
MgCl2溶液,25mM,PCR 級(jí)5mL保存SCHAEDLER瓊脂250g用于厭氧菌的分離培養(yǎng)

BETA-SSA瓊脂 BETA-SSA Agar 用于鏈球菌的選擇性分離培養(yǎng)

假單胞分離瓊脂 Pseudomonas Isolation Agar 250 用于假單胞菌群的測(cè)定

葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基250g/瓶用于真菌和腐生菌的檢驗(yàn)incubationmedia葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基250g/瓶用于真菌和腐生菌的檢驗(yàn)

2216ELiquidMedium

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