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DMSO,PCR 級(jí)1.5mL運(yùn)輸

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更新時(shí)間:2017-07-17 13:03:28瀏覽次數(shù):233次

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DMSO,PCR 級(jí)1.5mL運(yùn)輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

DMSO,PCR 級(jí)1.5mL運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門(mén)為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開(kāi)發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
DMSO,PCR 級(jí)1.5mL運(yùn)輸變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過(guò) 95。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過(guò)高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
DMSOPCR 級(jí)1.5mL運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過(guò)低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒(méi)有必要。
DMSO,PCR 級(jí)1.5mL運(yùn)輸詳細(xì)說(shuō)明書(shū):

DMSO,PCR 級(jí)1.5mL運(yùn)輸使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見(jiàn)注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
15R-Prostaglandin E2 1 mg     9-oxo-11alpha。,15R-dihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15-epi PGE2|15R-PGE2 15R-Prostaglandin E2

Pentazocine 1 mg     Fortalgesic|NIH 7958|Pentagin|Talwin|WIN 20,228; 2R,6R,11R-rel-1,2,3,4,5,6-hexahydro-6,11-dimethyl-3-3-methyl-2-buten-1-yl-2,6-methano-3-benzazocin-8-ol

無(wú)水流鉀(1KG     potewwium Sulfate Anhydrous,   777-80-5; Formula: K2SO4; FW: 174.28

4Z),7Z),10Z),13Z-Hexadecatetraenoic Acid-d5 500 ug     4Z,7Z,10Z,13Z-hexadeca-4,7,10,13-tetraenoic-15,15’,16,16,16-d5 acid 4Z),7Z),10Z),13Z-Hexadecatetraenoic Acid-d5

AAPH 25 g     2,2-azobis-2-methyl-propanimidamide, dihydrochloride; AAPH

4-2-((2-Benzo[b]thiphen-3-yl-9-isopropyl-9H-purin-6-ylaminoethylphenol hydrochloride; SR1     StemRegenin 1
PtdIns-4,5-P2 1,2-dioctanoyl sodium salt 500 ug     1-1,2R-dioctanoylphosphatidylinositol-4,5-bisphosphate, trisodium salt; Phosphatidylinositol-45-bisphosphate C-8|DOPI-4,5-P2; PtdIns-4,5-P2 1,2-dioctanoyl sodium salt

PTC-209 10 mg     N-2,6-dibromo-4-methoxyphenyl-4-2-methylimidazo[1,2-a]pyrimidin-3-yl-2-thiazolamine

CAY10590 1 mg     4-[1-oxo-7-phenylheptylamino]-4R-octanoic acid; CAY10590

S-Dibutyl 3-Hydroxybutyl Phosphate 25 mg     S-TBP-OH; S-dibutyl 3-hydroxybutyl phosphate

Chloramphenicol 25 g     2,2-dichloro-N-[1R,2R-2-hydroxy-1-hydroxymethyl-2-4-nitnophenylethyl]-acetamide; CAF|CAM|CAP|NSC 3069 Chloramphenicol

DiaEasy Dialyzer (20 ml) MWCO 12-14 kDa     DiaEasy Dialyzer (20 ml) MWCO 12-14 kDa
13R-HODE 25 ug     13R-xy7noxy-9Z,11E-octadecadienoic acid 13R-HODE

CUDC-101 25 mg     7-[[4-[3-ethynylpxenylamino]-7-metxoxy-6-inoneazolinyl]oxy]-N-xy7noxy-hept*

Quest Fluo-8, 鉀鹽     Quest Fluo-8, potewwium salt

Oxandrolone 1 mg     4bS,7S9aS,9bR11aS-tetradecaxy7no-7-xy7noxy-4aS,6aS7-trimetxyl-cyclopenta[5,6]naphtho[1,2-c]pyran-21H-one; Anavar|NSC 67068|Oxandrin|SC 11585; Oxandrolone

Dihomo-γ-Linolenoyl Ethanolamide 5 mg     N-2-xy7noxyetxyl-8Z,11Z14Z-eicosatrienamide; Dihomo-γ-Linolenoyl Ethanolamide

Benzylpenicillin potewwium salt     Penicillin G potewwium USP
KF鏈球菌瓊脂用于鏈球菌的選擇性分離及計(jì)數(shù)

乳糖膽鹽培養(yǎng)基 Lactose Bile Medium 用于化妝品中糞大腸菌群的測(cè)定(GB標(biāo)準(zhǔn))

亮綠瓊脂 Brilltant Green Agar 250 沙門(mén)氏菌分離培養(yǎng)

兔血漿0.5ml*20用于*凝固酶試驗(yàn)incubationmedia兔血漿0.5ml*20用于*凝固酶試驗(yàn)

葡萄糖銨培養(yǎng)基 250g 用于志賀氏菌的葡萄糖銨試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
Power-nitratemedium

*發(fā)酵培養(yǎng)基 Mannitol Medium 生化試驗(yàn)培養(yǎng)基,用于細(xì)菌(如*)*發(fā)酵試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))

乙酸鹽瓊脂 Acetate Agar 250 細(xì)菌醋酸鹽試驗(yàn)

水平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基用于飼料中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定incubationmedia水平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基用于飼料中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定

40%UreaWater
DMSO,PCR 級(jí)1.5mL運(yùn)輸啶酮酸(5.0mg)5.0mg/*5

BBL瓊脂培養(yǎng)基 BBL Agar Medium 用于雙岐桿菌分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))

梭菌培養(yǎng)基 Clostridium Enrichment Medium 250 用于梭菌增菌培養(yǎng)

*乳糖無(wú)電解質(zhì)培養(yǎng)基250g/瓶無(wú)抑制性,用于泌尿系統(tǒng)致病菌的分離和培養(yǎng),也可做深部培養(yǎng)的貯運(yùn)incubationmedia*乳糖無(wú)電解質(zhì)培養(yǎng)基250g/瓶無(wú)抑制性,用于泌尿系統(tǒng)致病菌的分離和培養(yǎng),也可做深部培養(yǎng)的貯運(yùn)

M-腸道菌瓊脂 250g 用于水中或其它物質(zhì)中腸球菌分離培

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