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T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次保存

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更新時間:2017-07-17 14:00:25瀏覽次數(shù):156次

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T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次保存產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次保存DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測,一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次保存詳細(xì)說明書:

T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次保存使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
Δ17-6-keto Prostaglandin F1α 500 ug     6-oxo-9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prosta-13E,17Z-dien-1-oic acid; ω-3 6-keto PGF2α; Δ17-6-keto Prostaglandin F1α

Amodiainonee 50 mg     Camoinonee|Flavoinonee|NSC 13453|SN 10751 4-[7-chloro-4-inoneolinylamino]-2-[diethylaminomethyl]-phenol

酵母提取物(1KG     Yeast Extract, 8013-01-3

FUB-PB-22 10 mg     inoneolin-8-yl-1-4-fluorobenzyl-1H-indole-3-carboxylate; FUB-PB-22

Sclerotiorin 1 mg     7-acetyloxy-5-chloro-3-[1E,3E,5S-35-dimethyl-1,3-heptadien-1-yl]-7-methyl-6H-2-benzopyran-6,87H-dione; Sclerotiorin

N-[2-[2-4-Methoxyphenylethenyl]-4-inoneazolinyl]-N,N-dimethyl-1,3-propanediamine Dihydrochloride     CP-31398 Dihydrochloride
DPP Assay Substrate 1 ea     DPP Substrate; DPP Assay Substrate

銀杏酸     Ginkgolic acid 5 mg

Neurodezine 10 mg     2-[5-3-chlorophenyl-2-furanyl]-4,5-bis4-methoxyphenyl-1H-imidazole; Neurodezine

4-fluoro PV9 hydrochloride 1 mg     4-fluoro α-POP|para-fluoro-PV9; 1-4-fluorophenyl-2-pyrrolidin-1-yloctan-1-one, monohydrochloride

 N-pentanoic acid metabolite-d5 500 ug     5-3-2,23,3-tetramethyl-cyclopropanecarbonyl-1H-indol-1-ylpentanoic acid-2,45,6,7-d5; XLR11 N-pentanoic acid metabolite-d5;  N-pentanoic acid metabolite-d5

N-Palmitoyl Taurine (50 mg)     N-Palmitoyl Taurine, 2-[(1-oxohexadecyl)amino]-ethanesulfonic acid
96-Well Solid Plate Colorimetric Assay 100 ea     96-Well Solid Plate Colorimetric Assay

L-     6-deoxy-L-Galactose; 6-deoxy-L-galactose

鈣離子指示探針Cal-520FF 鉀鹽     Cal-520FF, potewwium salt

Lutein 500 ug     E 161b|FloraGLO|Xanthophyll; 6R-β,ε-carotene-3R,3R-diol

Phytanic Acid 25 mg     3,711,15-tetrametxylhexadecanoic acid; Phytanic Acid

trans-4-[[5S-5-[[[35-bistrifluorometxylpxenyl]metxyl]2-metxyl-2H-tetrazol-5-ylamino]-2,34,5-tetraxy7no-7,9-dimetxyl-1H-1-benzazepin-1-yl]metxyl]- cyclohexanecarboxylic acid; LY2484595     Evacetrapib
結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)2222g用于水或食品中大腸菌群平板菌落計數(shù)(GB4789.3-2002)

脫氧膽酸鹽檸檬酸鹽瓊脂 (CM0035) Oxoid incubation media 脫氧膽酸鹽檸檬酸鹽瓊脂 (CM0035) Oxoid

苜蓿根瘤菌 產(chǎn)脂肪酶 /

mTSBBrothWithNovobiocin

PPLOAgar
0.0每支添加于HB4086

Combinednitrogen-fixingbacteriamedium

布氏肉湯 Brucella Broth 250 用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂制備(SN標(biāo)準(zhǔn))

細(xì)菌保存培養(yǎng)基250g/瓶用于菌種培養(yǎng)與保存,可制備菌種保存斜面(pH7.3)incubationmedia細(xì)菌保存培養(yǎng)基250g/瓶用于菌種培養(yǎng)與保存,可制備菌種保存斜面(pH7.3)

Baird-ParkerAgarBase
T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次保存基酸脫羧酶試驗(yàn)基礎(chǔ)培養(yǎng)基22090250g供鑒別腸道菌屬能否產(chǎn)生基酸脫羧酶用

7221-prf PADM-prf 前脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基 500 ml incubation media 7221-prf PADM-prf 前脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基 500 ml

BrilliantGreenLactoseBileBroth

亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ)250g用于*的增菌培養(yǎng)。每培養(yǎng)基需另加入鈉1ml

STAA培養(yǎng)基 250g 用于熱死環(huán)絲菌的分離培養(yǎng)。

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