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昆蟲種屬鑒定 PCR Mix100 次運輸

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更新時間:2017-07-17 14:19:25瀏覽次數(shù):176次

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昆蟲種屬鑒定 PCR Mix100 次運輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

昆蟲種屬鑒定 PCR Mix100 次運輸產(chǎn)品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
昆蟲種屬鑒定 PCR Mix100 次運輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
昆蟲種屬鑒定 PCR Mix100 次運輸DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
昆蟲種屬鑒定 PCR Mix100 次運輸使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
13,14-dihydro Prostaglandin F1α 1 mg     9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prostan-1-oic acid; PGFα|13,14-dihydro PGF1α; 13,14-dihydro Prostaglandin F1α

MMB018 1 mg     methyl 1-pentyl-1H-indole-3-carbonyl-L-valinate

過濾水(6X500ML     Purified Water, 18 mega-ohm purified water. Cell culture tested. Sterile Filtered

Tetrodotoxin 1 mg     4R,4aR,5R7S,9S10S,10aR11S,12S-2-ami,44a,59,10-hexahydro-12-hydroxymethyl-5,9:710a-dimetha0aH-[1,3]dioxocino[65-d]pyrimidine-4,710,11,12-pentol; Araregai Toxin|Maculotoxin|TTX|Tectin; Tetrodotoxin

Prostaglandin A1 methyl ester 1 mg     15S-hydroxy-9-oxo-prosta-1013E-dien-1-oic acid, methyl ester; PGA1 methyl ester Prostaglandin A1 methyl ester

5,74-Trihydroxyflavanone 2,3-dihydro-57-dihydroxy-2-4-hydroxyphenyl-4H-1-benzopyran-4-one; NGEN     Naringenin
G6PDH Substrate 1 ea     G6PDH Substrate

*標記*基化組蛋白H4K20多肽     Biotinylated Trimethyl Histone H4K20 Peptide 200 ul

Thiamet G 10 mg     2-ethylamino-3aR6S,7R,7aR-tetrahydro-5R-hydroxymethyl-5H-pyrano[3,2-d]thiazole-6,7-diol Thiamet G

PLX4720 1 mg     Raf Kinase Inhibitor V; N-[3-[5-chloro-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-3-ylcarbonyl]-2,4-difluorophenyl]-1-propanesulfonamide

β-Glycerophosphate sodium salt hydrate 100 g     2-dihydrogen phosphate-12,3-propanetriol, disodium salt, pentahydrate β-Glycerophosphate sodium salt hydrate

13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin E2 Lipid Maps MS Standard (50 mg)     13,14-dihydro-15-keto PGE2, 13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin E2 Lipid Maps MS Standard, 9,15-dioxo-11α-hydroxy-prost-5Z-en-1-oic acid
SPE Cartridges pxenyl 25 ea     SPE Cartridges pxenyl

1,2-O-Dihexadecyl-rac-glycerol 250 mg     2,3-bishexadecyloxy-1-propanol

yenine 3。5 單琥珀酰亞胺脂 [相當于Cy3。5 NHS]     yenine 35, monosuccinimidyl ester [equivalent to Cy35 NHS ester]

Agomelatine 50 mg     N-[2-7-metxoxy-1-naphthalenyletxyl]-acetamide; Valdoxan Agomelatine

5S),6R-Lipoxin A4 50 ug     5S6R,15S-trixy7noxy-7E9E,11Z,13E-eicosatetraenoic acid; 5S),6R),15S-TriHETE|5S),6R-LXA4 5S),6R-Lipoxin A4

N6-metxyl-R-roscovitine; Amyloid-β Forty-Two Inducer 4     Aftin-4
Campy-CefexSupplement

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昆蟲種屬鑒定 PCR Mix100 次運輸BrucellaSelectiveMedium

50192 胰蛋白胨(進口) BR 500g 酪蛋白*水解而成的胨,培養(yǎng)基原材料 incubation media 50192 胰蛋白胨(進口) BR 500g 酪蛋白*水解而成的胨,培養(yǎng)基原材料

粉狀畢赤酵母 分解纖維素 /

NutrientAgar

DTMAgar

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