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植物種屬鑒定 PCR Mix 11100 次運輸

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更新時間:2017-07-17 14:27:02瀏覽次數(shù):279次

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植物種屬鑒定 PCR Mix 11100 次運輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

植物種屬鑒定 PCR Mix 11100 次運輸產(chǎn)品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
植物種屬鑒定 PCR Mix 11100 次運輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
植物種屬鑒定 PCR Mix 11100 次運輸DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
植物種屬鑒定 PCR Mix 11100 次運輸使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
17-trifluoromethylphenyl-13,14-dihydro trinor Prostaglandin F1α 1 mg     9alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-17-trifluoromethylphenyl-18,19,20-trinor-prostan-1-oic acid; 17-TFM-PGF1α; 17-trifluoromethylphenyl-13,14-dihydro trinor Prostaglandin F1α

Alprenolol hydrochloride 50 mg     H 56/28; 1-[1-methylethylamino]-3-[2-2-propen-1-ylphenoxy]-2-propanol, monohydrochloride

聚蔗糖400(菲可400)(25GM     Polysucrose 400 Ficoll 400 , Polysucrose 400 suitable for cell culture. Compare to Ficoll 400.

PTIO 100 mg     4,5-dihydro-44,55-tetramethyl-2-phenyl-3-oxide-1H-imidazol-1-yloxy; α-Phenyltetramethylnitnonyl nitnoxide; PTIO

Triphenylphosphine oxide 1 g     triphenyl-phosphine oxide NSC 398|TPPO; Triphenylphosphine oxide

Phosphate Buffered Saline PBS     Phosphate Buffered Saline PBS
SIRT6 Direct NAD+ 1 ea     SIRT6 Direct NAD+

*標記二甲基化組蛋白H3K9多肽     Biotinylated Dimethyl Histone H3K9 Peptide 100 ul

L-DOPA 100 g     3-hydroxy-L-tyrosine; Levodopa|Pardopa|Syndopa|3,4-Dihydroxyphenylalanine L-DOPA

FAB-144 5 mg     1-5-fluoropentyl-1H-indazol-3-yl)(2,2,3,3-tetramethylcyclopropylmethanone

S-3,5-DHPG 10 mg     (αS-amino-35-dihydroxy-benzeneacetic acid; S-35-Dihydroxyphenylglycine; S-35-DHPG

Prostaglandin E2-d4 Lipid Maps MS Standard (5 mg)     Dinoprostone-d4|PGE2-d4, Prostaglandin E2-d4 Lipid Maps MS Standard, 9-oxo-11α 15S-dihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic-3,3,4,4-d4 acid
TBS Assay Buffer Concentrate 10X 10 mL     TBS Assay Buffer Concentrate 10X

Palmitic Acid-d31 100 mg     hexadecanoic-2,2,3,3,4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,9,9,10,10,11,11,12,12,13,13,14,14,15,15,16,16,16-d31 acid

yenine 7 [相當于Cy7]     yenine 7 amine [equivalent to Cy7 amine]

Amiodarone xy7nochloride 10 g     2-butyl-3-benzofuranyl[4-[2-dietxylaminoethoxy]-3,5-diiodopxenyl]-metxanone, monoxy7nochloride Cordarex|Pacerone ; Amiodarone xy7nochloride

Docosahexaenoic Acid etxyl ester 100 mg     24,6,8,10,12-docosahexaenoic acid, etxyl ester; Cervonic Acid etxyl ester|DHA etxyl ester; Docosahexaenoic Acid etxyl ester

1-[4R,5S-5-[2-Aminoetxylamino]-N2-10,12-dimetxyl-1-oxotetradecyl-4-xy7noxy-L-ornithine]-5-[3R-3-xy7noxy-L-ornithine]-pneumocandin B0; L 743872 MK 0991     Caspofungin acetate
EB增菌液凍干配套試劑SR0090支添加于225ml(0260EB增菌液。

血瓊脂基礎(chǔ) No. 2 (CM0271) Oxoid incubation media 血瓊脂基礎(chǔ) No. 2 (CM0271) Oxoid

沙鏈霉菌 /

MPCAgarMedium

增菌肉湯培養(yǎng)基E 250g 用于腸桿菌科細菌的增菌培養(yǎng)
-蛋白胨緩沖液250g用于藥品中細菌的前增菌或樣品制備。

亮綠酚紅乳糖蔗糖瓊脂 incubation media 亮綠酚紅乳糖蔗糖瓊脂

AdditivesTyrosineAgar 10/

血瓊脂基礎(chǔ)2BloodAgarBaseN0.2供分離營養(yǎng)要求非常高的致病菌用,后加血液制成血平板

牛奶培養(yǎng)基 250g 用于乳酸菌凝固力及乳酸鑒別試驗
植物種屬鑒定 PCR Mix 11100 次運輸HB7035

50090 酵母提取粉 BR 400g 培養(yǎng)基原材料,含有豐富的B族維生素、氨基酸 incubation media 50090 酵母提取粉 BR 400g 培養(yǎng)基原材料,含有豐富的B族維生素、氨基酸

佛羅里達無孢子側(cè)耳 乳酸菌制劑 /

BCYE-CYSAgar

YeastExtractPeptone

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