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真細菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次運輸

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更新時間:2017-07-18 12:17:58瀏覽次數(shù):375次

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真細菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次運輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

 

真細菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次運輸產(chǎn)品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
真細菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次運輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合.
真細菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次運輸DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
真細菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次運輸使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
Prostaglandin F2α 5 mg     9α,11α,15S-trihydroxy-prosta-5Z13E-dien-1-oic acid; Dinoprost|PGF2α; Prostaglandin F2α

Cefoxitin sodium salt 1 g     Betacef|Cenomycin|Farmoxin|Mefoxin|Merxin; 6R,7S-3-[[aminocarbonyloxy]methyl]-7-methoxy-8-oxo-7-[2-thienylacetylamino]-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid, monosodium salt

四水肖鈣(500GM     Calcium nitnate, 4H2O 13477-34-4; 99%; HAZARDOUS MATERIAL

Clenbuterol hydrochloride 25 mg     4-amino-3,5-dichloro-α-[[1,1-dimethylethylamino]methyl]-benzenemethanol monohydrochloride; NAB 365|Ventipulmin; Clenbuterol hydrochloride

7Z-Tricosene 10 mg     7Z-tricosene; 7Z-Tricosene

Cathepsin G抑制劑     Cathepsin G Inhibitor
TBS-Corey Lactone Aldehyde 1 g     [3aR-3aa,4a5b,6aa]-5-tert-butyl-dimethylsilylhexahydro-2-oxo-2H-cyclopenta[b]furan-4-carboxaldehyde TBS-Corey Lactone Aldehyde

*標記二甲基化組蛋白H3K27多肽     Biotinylated Dimethyl Histone H3K27 Peptide 100 ul

FTY720 phenoxy-biotin 100 ug     2-amino-2-[2-4-octylphenylethyl]-1,3-propanediol-N-biotinoyl-1,5-diampentane FTY720 phenoxy-biotin

3,4-EDMA hydrochloride 5 mg     3,4-Ethylenedioxy-N-methylamphetamine; 1-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]dioxin-6-yl-N-methylpropan-2-amine, monohydrochloride

Z-DEVD-FMK 500 ug     N-[phenylmethoxycarbonyl]-L-α-aspartyl-L-α-glutamyl-N-[1S-3-fluoro-1-2-methoxy-2-oxoethyl-2-oxopropyl]-L-valinamide, 1,2-dimethyl ester; Z-DEVD-FMK

PtdIns--4)-P1 -1,2-dioctanoyl) -ammonium salt) (5 mg)     DOPI-4-P1|Phosphatidylinositol-4-phosphate C-8, PtdIns--4)-P1 -1,2-dioctanoyl) -ammonium salt), 1-(1,2-dioctanoylphosphatidyl)inositol-4-phosphate, diammonium salt
Prostaglandin E2 Express AChE Tracer 500 dtn     PGE2 EIA Express Tracer; Prostaglandin E2 Express AChE Tracer

5-Azidopentanoic Acid 250 mg     5-Azidovaleric acid|Click Tag

SunRed SE     SunRed SE

R-Butaprost 1 mg     9-oxo-11。alpha。,16R-dixy7noxy-17-cyclobutyl-prost-13E-en-1-oic acid, metxyl ester; 15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester|TR 4978|(±)-15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester R-Butaprost

Arachidonoyl 2-Chloroetxylamide 10 mg     N-2-chloroetxyl-5Z,8Z11Z,14Z-eicosatetraenamide; ACEA|2-chloro-AEA; Arachidonoyl 2-Chloroetxylamide

6-N-[2-[[4-2,4-dichloropxenyl-5-imidazol-1-ylpyrimidin-2-yl]amino]etxyl]-3-nitnopyridine-2,6-diamine CT 98014     CHIR-98014
Fraser培養(yǎng)基250g用于李氏菌的增菌培養(yǎng)

亞鐵瓊脂 Ferric Sulfite Agar 用于厭氧亞鹽還原梭菌的計數(shù)

改良沙氏瓊脂培養(yǎng)基 Sabourauds AgarModified 250 真菌檢測

22iddlebrookOADC增菌液20ml×20/箱每支用于中incubationmedia22iddlebrookOADC增菌液20ml×20/箱每支用于中

阪崎桿菌顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于阪崎桿菌的顯色培養(yǎng),阪崎桿菌顯藍色,其它腸桿菌顯無色
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液250g用于大腸菌群,糞大腸菌群,大腸桿菌的測定(GB標準)

抗生素檢定培養(yǎng)基2(pH) Antibiotic Agar NO.2 用于四環(huán)素,*等效價測定

Honda氏產(chǎn)毒肉湯基礎 Honda Toxin-Producing Base 250 致瀉大腸艾希氏產(chǎn)毒培養(yǎng)

亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎250用于*的增菌培養(yǎng)。每培養(yǎng)基需另加入鈉ncubationmedia亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎250用于*的增菌培養(yǎng)。每培養(yǎng)基需另加入鈉1ml

動力-吲哚-尿素培養(yǎng)基基礎
真細菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次運輸動力—鹽培養(yǎng)基(A)22270250g供鑒別測定細菌液化明膠用

4701-prf SM-prf 滑膜細胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 4701-prf SM-prf 滑膜細胞培養(yǎng)基 500 ml

TryptoseSoyaAgar

MC培養(yǎng)基(不含瓊脂)250g用于嗜熱鏈球菌增菌培養(yǎng)

硫細菌培養(yǎng)基 250g 用于硫細菌的分離培養(yǎng)

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