一站式 TA 克隆試劑盒 ( 含感受態(tài) )20 次*詳細說明書：

一站式 TA 克隆試劑盒 ( 含感受態(tài) )20 次*產(chǎn)品及特點：
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細胞，適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株，用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測，本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達 107CFU/μg。 DH10Bac 細胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個 mini-F 復制子、*抗性基因、att Tn7 位點和 lac Zα-互補因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域，該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒（pFastBac1，pFastBacDual 等）含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重組臂，Tn7R 和 Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動子、多克隆位點和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號。當含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細胞后，發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid，提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細胞 Sf9 或 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外，DH10Bac 細胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補現(xiàn)象，用于重組 bacmid 的藍白斑篩選。
一站式 TA 克隆試劑盒 ( 含感受態(tài) )20 次*規(guī)格及成分：

一站式 TA 克隆試劑盒 ( 含感受態(tài) )20 次*使用方法：
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板：50 μ g/mL Kanamycin，7 μ g/mL gentamicin，10 μg/mL tetracycline，100 μg/mL X-gal，40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為 50-100 μL，可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以 100 μL 感受態(tài)細胞為例。
3. 待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒，用移液器輕輕吹打混勻，冰浴 30 分鐘。
4. 42℃熱擊 90 秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC（不含抗生素），混勻后置于 37℃ 搖床， 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時。
6. 用 SOC 培養(yǎng)基進行 10 倍梯度稀釋，如分成 3 個稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各個梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后，倒置平板， 37℃培養(yǎng) 24-48 小時。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃，視平板上菌落生長情況決定去留。
GAG-P24重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group O, strain BCF06) (His 標簽) Protein

TGF- BetaR1/ALK (TGF-beta receptor type I 0.5mgTGF- BetaR1/ALK (TGF-beta receptor type I) 轉(zhuǎn)移生長因子–β受體1抗原

ADAM12重組人 ADAM12 蛋白 (His 標簽) Protein

KIRREL Protein Human 重組人 KIRREL1 / NEPH1 蛋白 (His 標簽)

CSF3 Protein Human 重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)
HA Protein H4N4 重組甲型流感 H4N4 (A/mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)

趨化因子C-C-基元配體14(CCL14)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Ligand 14 (CCL14)

DCN重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CD1D & B2M重組人 CD1D & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

AIMP1 Protein Human 重組人 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 (His 標簽)
TGF- BetaR1/ALK (TGF-beta receptor type I 0.5mgTGF- BetaR1/ALK (TGF-beta receptor type I) 轉(zhuǎn)移生長因子–β受體1抗原

KIRREL Protein Human 重組人 KIRREL1 / NEPH1 蛋白 (His 標簽)

GAG-P24重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group O, strain BCF06) (His 標簽) Protein

CSF3 Protein Human 重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)

ADAM12重組人 ADAM12 蛋白 (His 標簽) Protein
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