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一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 中 pH)30 次操作步驟

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更新時間:2017-07-19 15:19:00瀏覽次數(shù):147次

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一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 中 pH)30 次操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( pH)30 次操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( pH)30 次操作步驟產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( pH)30 次操作步驟詳細說明書:

一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( pH)30 次操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
井岡霉素5

(對硝本基-b-D-

四醋酸鉛,英文名或英文縮寫:Lead(IV)acetate,級別:CP,98.5%,規(guī)格:1

8-羌基流醋鹽;流醋-8-羌基;流醋氧化;奎諾蘇 8-xy7noxyinoneolinq sulfctq;8-inoneophqnol sulfctq;Oxinq sulfctq;inoneosol;Chinosol 134-31-6

鍺,英文名或英文縮寫:Germanium,級別:AR99.5%,規(guī)格:25
銅絲2528

98-98-62-羧酸Picolinic acid

氫氧化鋅shēng huà shì jì容量:RT25

2,5-二基吲哚,98% 2,5-Dimqthylindolq 1196-79-8

α--4-羥基肉桂酸,英文名或英文縮寫:ACCA,級別:AR,99%,規(guī)格:100
ADA-2NaN-(2-乙酰胺基)亞基二乙酸二鈉鹽5AR99%

39382-08-6磷脂酰乙醇胺(冷藏運輸)PhosphatidylethanolaMine

Oliveoil洋橄欖油5BR,97%

(S)-2,5-二氫-36... (S)-2,5-Dihydro-3,6-dimethoxy-2-isopro... 78342-42-4 1ML 通用試劑

異阿魏酸 3-Hydroxy-4-methoxycinnamic acid (98... 537-73-5 20MG 標準品
EED Others Human EED / Embryonic Ectoderm Development 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人前列腺平滑肌細胞cDNAHPSMC cDNA

雜交瘤(B);C3110D2B2

BT549細胞,管癌細胞 人喉癌細胞,M4e細胞 大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A4

NCR3 Others Human NKp30 人細胞裂解液 (陽性對照)
人前列腺平滑肌細胞cDNAHPSMC cDNA

EED Others Human EED / Embryonic Ectoderm Development 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

雜交瘤(B);C3110D2B2

BT549細胞,管癌細胞 人喉癌細胞,M4e細胞 大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A4

NCR3 Others Human NKp30 人細胞裂解液 (陽性對照)
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( pH)30 次操作步驟人結(jié)直腸癌細胞;T84 大鼠甲狀腺上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

神經(jīng)元細胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml)

EPHB1 Others Human EPHB1 / EPHT2 人細胞裂解液 (陽性對照)

豬腎細胞;PK-15

BPH-1, 人前列腺增生細胞

OP9 小鼠骨髓基質(zhì)細胞

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