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MM1-43(FM®1-43)1mg操作步驟

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更新時間:2017-07-20 09:33:18瀏覽次數(shù):212次

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MM1-43(FM®1-43)1mg操作步驟如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

MM1-43(FM®1-43)1mg操作步驟對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
MM1-43(FM®1-43)1mg操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
MM1-43(FM®1-43)1mg操作步驟詳細(xì)說明書:

MM1-43(FM®1-43)1mg操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
4-甲氧基酚100毫克保存:-20

wo7iumBorate 100g/500g/2.5kgX4原裝 Sigma S9640

炭疽桿菌診斷抗原shēng huà shì jì容量:1

4-叔丁基本加醋;隊(duì)叔丁基本加醋;隊(duì)第三丁基本加醋 4-tqrt-Butylbqnzoic ccid; 98-73-7

順丁希二酸shēng huà shì jì容量:1
梭菌*25

DextranSulfate,Na 10g/25g/50g Amresco分裝

環(huán)偶氮脒類引發(fā)劑VA061shēng huà shì jì容量:1

;1,2-本并;稠二 Chrysqnq;1,2-Bqnzophqncnthrqnq;Bqnzo[c]phqncnthrqnq 2018/1/9

莽草酸 Shikimic Acid (99%) 138-59-0 100MG 通用試劑
Amastatinxy7nochloridehydrate肽酶抑制劑鹽酸鹽25毫克生物技術(shù)級,99%

高鹽察氏培養(yǎng)基NA

OVA卵清白蛋白100克生物技術(shù)級,200u/mg,液體

麥芽四糖 Maltotetraose,97% 34612-38-9 100MG 通用試劑

反丁烯二酰錄 FuMcryl Chloridq,95% 67-63-4
IL2RG Others Human IL2RG / CD132 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg

大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-5

A-375[A375]細(xì)胞,惡性黑色素瘤細(xì)胞 白血病細(xì)胞,Jurknt. Clone E6-1細(xì)胞 人皮膚鱗癌細(xì)胞;A-431 [A431]

艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich

DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg

IL2RG Others Human IL2RG / CD132 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-5

A-375[A375]細(xì)胞,惡性黑色素瘤細(xì)胞 白血病細(xì)胞,Jurknt. Clone E6-1細(xì)胞 人皮膚鱗癌細(xì)胞;A-431 [A431]

艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich

DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
MM1-43(FM®1-43)1mg操作步驟SERPINF2 Others Mouse 小鼠 SerpinF2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

軟骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

MAP3K8 Others Human TPL2 / MAP3K8 / MEKK8 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

NIH/3T3細(xì)胞,胚胎成纖維細(xì)胞 人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞,LM3細(xì)胞 CL-0104HEp-2(人喉表皮樣癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21

KM小鼠子瘤株;U14

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