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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>ATCC細(xì)胞>>腫瘤細(xì)胞>> Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-568圖片
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-09-07 11:57:53瀏覽次數(shù):160次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)GFP標(biāo)記的小鼠子細(xì)胞;U14-GFP圖片
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-568圖片凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來(lái)從美國(guó)ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來(lái)自全國(guó)各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來(lái)源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨期 |
貼壁生長(zhǎng) | 3-5天 |
細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-568圖片
形態(tài)特性 上皮樣;多角
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使HCT116細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Puromycin,經(jīng)2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS;2ug/ml Puromycin
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:7,10;D12S391:17,21;D13S317:10,12;D16S539:11,13;D18S51:17,17;D19S433:12,13;D21S11:29,30;D2S1338:16,16;D3S1358:12,19;D5S818:10,11;D6S1043:13,13;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:18,23;Penta E:13,14;TH01:8,8;TPOX:8,8;vWA:17,22;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-568圖片復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-568圖片操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CL-0160Molt-4(人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞裂解物HASMCL
SK-HEP-1細(xì)胞,人肝癌細(xì)胞 人低轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞,95-C細(xì)胞 腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-1
TIMP1 Others Human 人 TIMP-1 / TIMP1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CSC, 小鼠心肌細(xì)胞 Mouse
CM-R024大鼠淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(脂肪)(HMSC-ad)(5×105)
小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1 小鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人紅系白血病細(xì)胞;TF-1
SPARC Others Mouse 小鼠 SPARC / BM-40 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B
人成纖維母細(xì)胞-(HDF-a)( 5×105 )
人星形膠質(zhì)細(xì)胞
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LoVo 大鼠輸尿管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
PC-12(高分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化)
SLAMF6 Others Human 人 Ly108 / SLAMF6 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
志賀氏菌增菌肉湯250g用于志賀氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
Inorganicphosphorusbacteria
標(biāo)準(zhǔn)I號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂 Standard I Nutrient Agar 250 標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌計(jì)數(shù)、含糖(MERCK方法)
Letheen肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用于化妝品衛(wèi)生微生物檢測(cè),每升培養(yǎng)基中需添加0204incubationmediaLetheen肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用于化妝品衛(wèi)生微生物檢測(cè),每升培養(yǎng)基中需添加0204
OxfordAgarBase
苯丙酸培養(yǎng)基2300g用于鑒別細(xì)菌利用銨鹽作為*氮源并分解葡萄糖的試驗(yàn)。
4201-prf MCM-prf 腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 4201-prf MCM-prf 腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
10%TrypticaseSoyBroth
乙基紫肉湯(litsky肉湯)250g用于鏈球菌增菌培養(yǎng)
YNB培養(yǎng)基 100g 用于基因工程中酵母菌的發(fā)酵培養(yǎng)
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-568圖片鹽肉湯250g用于蠟樣芽孢桿菌鹽還原試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
腸道菌計(jì)數(shù)瓊脂(VRBDA) Violet Red Bile Dextrose Agar 用于腸道菌計(jì)數(shù)和腸桿菌科鑒別
Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒 10ml*2 用于吲哚(靛基質(zhì))試驗(yàn)配套試劑
6.5%氯葡萄糖瓊脂250g/瓶用于腸球菌確證和培養(yǎng)incubationmedia6.5%氯葡萄糖瓊脂250g/瓶用于腸球菌確證和培養(yǎng)
月桂基鹽胰蛋白胨MUG培養(yǎng)基 250g 用于O157菌檢測(cè),不含MUG(SN標(biāo)準(zhǔn))
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-568圖片現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。
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