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更新時間:2017-09-07 12:47:04瀏覽次數(shù):132次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞;DU145-Cas9-540圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使Du145細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:4~1:6傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,y;CSF1PO:10,11:D12S391:18,20;D13S317:12,14;D16S539:11,11;D18S51:12,12;D19S433:13,13;D21S11:31,32,33;D2S1338:16,16;D3S1358:16,16;D5S818:10,13;D6S1043:11,11;D7S820:7,10,11;D8S1179:13,14;FGA:22,22;Penta E:12,12;TH01:7,7;TPOX:11,11;vWA:17,18;
同工酶
染色體
使用權限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞;DU145-Cas9-540圖片質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞;DU145-Cas9-540圖片細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞;DU145-Cas9-540圖片培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風險和責任,采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
AGO2 Others Human 人 AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0192RBL-2H3(大鼠嗜堿性細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
人腦血管周細胞cDNAHBVP cDNA
B16細胞,小鼠黑色素瘤細胞 人小細胞肺癌細胞,LTEP-sm細胞 角膜內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
犬腎細胞系/IgR;MDCK/IgR
PLAT Others Human 人 PLAT / tPA 人細胞裂解液 (陽性對照)
rCF, 大鼠心臟成纖維細胞 Rattus
CM-H032人食管平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠神經(jīng)黑質(zhì)細胞(RNsn)(1×106)
正常小鼠Sertoli細胞;TM4 小鼠子宮平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KB
EPHA4 Others Mouse 小鼠 EPHA4 / HEK8 人細胞裂解液 (陽性對照)
SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細胞;PUMC-HUVEC-T1
大鼠中腦縫神經(jīng)細胞(腦脊)(RNr)(1×106)
CM-H040人結腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
正常小鼠Leydig細胞;TM3 小鼠子宮頸上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
RLFs, 大鼠肺成纖維細胞 Rattus
FETUB Others Mouse 小鼠 FETUB / Fetuin-B 人細胞裂解液 (陽性對照)
minimumNutritionalV-BMedium
C.L.E.DMediumSupplement
V-J瓊脂 Vogel-Johnson Agar 250 病源標本和其它標本中*陽性*的選擇性分離(Merck方法)
糖發(fā)酵培養(yǎng)基250g/瓶溴*藍為指示劑,不含碳源,用于糖發(fā)酵試驗(GB、藥典)incubationmedia糖發(fā)酵培養(yǎng)基250g/瓶溴*藍為指示劑,不含碳源,用于糖發(fā)酵試驗(GB、藥典)
WagstsumaBloodAgarBase
TM培養(yǎng)基250g用于淋球菌的分離培養(yǎng)(Quelab方法)
50071 BR 5Kg incubation media 50071 BR 5Kg
福氏志賀氏菌 食用 支/瓶
Stuart*管20支/包用于致病菌標本的運送保存
WLN培養(yǎng)基 250g 用于釀造和工業(yè)發(fā)酵過程中細菌、酵母菌和霉菌培養(yǎng)
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞;DU145-Cas9-540圖片亞鐵多粘菌素B瓊脂250g用于亞還原梭狀芽孢桿菌的計數(shù)
TMP瓊脂培養(yǎng)基 TMP Agar 用于*的分離培養(yǎng)
TM培養(yǎng)基 Thayer Martin Agar 250 用于淋球菌的分離培養(yǎng)(Quelab方法)
TSN瓊脂250g/瓶用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的選擇性分離和計數(shù)incubationmediaTSN瓊脂250g/瓶用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的選擇性分離和計數(shù)
苯*脫氨酶培養(yǎng)基 100 用于苯*脫氨酶試驗
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