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His標(biāo)簽抗體使用指南

來源:武漢艾美捷科技   2017年04月27日 16:22  

 

His標(biāo)簽抗體,抗His單抗,His小鼠源單克隆抗體

 

Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody ( 5C3)

 

His標(biāo)簽是由6個(gè)*(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設(shè)計(jì)用于重組蛋白質(zhì)的吸附純化。由于分子量較小,并且較容易分離和純化,His-tag 融合標(biāo)簽與其他標(biāo)簽相比有很多明顯優(yōu)勢, 是目前用于純化的融合標(biāo)簽中使用的一種。His抗體可以用于檢測和His標(biāo)簽融合表達(dá)蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)定位,以及純化、定性或定量檢測His融合表達(dá)蛋白等。然而,目前商品化His-tag的單克隆抗體(mAb)種類不多, 且價(jià)格也十分昂貴。

 

 

 

應(yīng)用類型:WB(1:1,000-1:10,000),IF(1:500-1:2,000),IP(1:200-1:500)

 

 

Fig.1.Immunofluorescence staining (1:2,000) of HA fusion protein in 293 cells with red and counterstained with DAPI.

 

Fig.2.Western blot analysis of 2ug His fusion protein with Anti-His mouse monoclonal antibody (5C3) in 1:5,000 dilution (lane A) and 1:10,000 dilution (lane B).

 

 

Fig.2.IP (1:200) - WB (1:3,000) analysis of His fusion protein expression in 293 cells. Untransfected 293 cell lysate (lane A), transfected 293 cell lysate with His-tag protein (lane B); IP untransfected 293 cell lysate with Anti HA tag mAb (lane C); IP transfected 293 cell lysate with normal Mouse IgG (lane D) or with Anti HA tag mAb (lane E).

 

免疫原:KLH偶聯(lián)的His標(biāo)簽HHHHHH多肽序列

 

來源宿主:小鼠

 

反應(yīng)性:該His標(biāo)簽抗體可識別在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的His標(biāo)記重組蛋白,包括His位于氨基末端、中段以及羧基末端的重組蛋白。

 

保存建議:在發(fā)貨后能在-20℃保存1年。為zui大限度的避免損失,請?jiān)诖蜷_管蓋之前融化抗體并離心。我們建議使用前分裝以避免反復(fù)凍融,分裝后可在4℃保存1個(gè)月。

 

如何選擇合適的His標(biāo)簽抗體?

 

在選擇His抗體時(shí),主要根據(jù)自己的需要,特別是實(shí)驗(yàn)應(yīng)用上的需要。其中需要考慮的因素包括了,His抗體的應(yīng)用檢測類型、His抗體的克隆性及制備來源等。比如該His抗體是否能用于Western Bloting的檢測?是否可以用于免疫熒光IF實(shí)驗(yàn)?我是否需要特異性更好的單克隆His標(biāo)簽抗體?我是否需要考慮下是選擇小鼠來源的還是兔來源的His抗體?

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