分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。
紫外可見分光光度計通常分為單光束、雙光束和雙波長三種類型。
一、單光束紫外可見分光光度計：
單個光束指的是從光源發(fā)出的光，通過單色器等。一系列光學(xué)元件穿過吸收單元，并且當(dāng)在探測器上照射時總是被照射為光束。它只有一束光(光束只能交替通過參考溶液、樣品溶液)，一個比色皿和一個光電轉(zhuǎn)換器。工作時，光路，首先通過多特定溶液，然后通過樣品溶液進(jìn)行光強(qiáng)度測量。
單光束分光光度計的特點是結(jié)構(gòu)簡單、價格低，主要適用于定量分析。測量結(jié)果受電源波動的影響很大，很容易給測量結(jié)果帶來很大的誤差。因此，他們的地位有限。一般來說，高要求制藥行業(yè)、質(zhì)量檢驗線加上不適合使用單光束紫外可見分光光度計;
雙光束紫外可見分光光度計：
雙光束是一種具有兩個單色光的紫外可見分光光度計。其光路設(shè)計基本上類似于單光束分光光度計。不同之處在于在單色器和吸收弛豫之間添加切割器。
該功能是將一個光束分成兩個相等強(qiáng)度的等光，在一定頻率下，一個通過參考溶液，另一個通過樣品溶液。然后，檢測器交替地接收參考信號和采樣信號。在接收到的光信號轉(zhuǎn)換成電信號后，由前置放大器放大，進(jìn)一步解調(diào)為放大等，后由顯示系統(tǒng)顯示
三、雙波長紫外可見分光光度計：
雙波長分光光度計使用兩個單色儀同時獲得兩個不同波長的單色光。光路是分開的。由光源發(fā)出的光被兩個單色器分開，以分離波長為4：和4z的單色光。通過調(diào)光器，兩個光束以一定的時間間隔交替照射到含有樣品測試溶液的相同吸收室，并且測試溶液在波長4'處的透射率或吸光度。檢測器顯示42和42。
雙波長分光光度計不僅可以測量高濃度樣品、多組分混合樣品，而且混濁樣品比單波長測量更靈敏。更具選擇性。在雙波長測量中，兩個波長的光通過相同的吸收單元，并且通過消除由、位置的差異和參考溶液的制備引起的誤差，pJ可以顯著提高測量的準(zhǔn)確度。
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