自然殺傷（NK）作為免疫細(xì)胞治療技術(shù)中具有代表性的細(xì)胞之一，于1975 年被學(xué)者Kiessling發(fā)現(xiàn)并命名,其起源于骨髓中的淋巴前體細(xì)胞，并在發(fā)育成熟后廣泛分布于外周血、骨髓、淋巴結(jié)、脾臟、肺和肝臟中。NK細(xì)胞是天然免疫系統(tǒng)的重要組成的一部分，它來源于CD34+造血干細(xì)胞，因其可以在沒有抗原預(yù)敏的條件下以主要組織相容性復(fù)合體（major histocompatibility complex, MHC）非限制性方式快速殺傷靶細(xì)胞而成為免疫治療的研究熱點(diǎn)。原代NK細(xì)胞是一種比較難培養(yǎng)的細(xì)胞,很多同學(xué)在培養(yǎng)過程會遇到諸多困擾，那么一起來了解一下NK細(xì)胞培養(yǎng)注意要點(diǎn)有哪些吧！

NK細(xì)胞培養(yǎng)注意要點(diǎn)如下:

1. 所使用試劑避免反復(fù)凍融，使用時注意無菌操作。

2. 在第0天，NK細(xì)胞激活劑按照培養(yǎng)基體積（包括血漿量）的1%添加。

3. 第0天的細(xì)胞接種密度可以在2.5~3.5×106個/mL的范圍內(nèi)，如果是復(fù)蘇的單個核細(xì)胞，建議提高接 種密度至4×106個/mL。

4. 采血量可以根據(jù)每mL外周血1×106個PBMCs估算。

5. 采血時不能用EDTA抗凝劑，可選用肝素或者枸櫞酸NA抗凝劑。

6. 復(fù)蘇的PBMCs、血漿異常的樣本可以使用 SuperGrow® 細(xì)胞培養(yǎng)添加物替代自體血漿。

7.當(dāng)培養(yǎng)基平衡至室溫時再使用。

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