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利用干擾實(shí)驗(yàn)即可辨別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原,方法如下:
1、將針對(duì)試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液。
2、37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體。
3、后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物。
4、實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測其標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對(duì)的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造elisa試劑盒。
5、如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實(shí)際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對(duì)的是目的抗原。
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