Hoechst 33342染色液正在熱銷的產(chǎn)品：E1 glycoprotein 風(fēng)疹病糖蛋白抗體雙環(huán)己酮草酰二腙 98.0%
GM-CSF 粒-巨噬克隆激因子抗體 AR，99.5%
GM-CSFR alpha/CD116 粒-巨噬集落激因子受體α抗體二硫化碳 ACS, ≥99.9%
GM-CSFR Beta 粒-巨噬集落激因子受體β抗體二硫化碳 for HPLC, ≥99.9%
Fx1A
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
中文名稱：Hoechst 33342染色液
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：10ml|50ml
貨號(hào)：FS-X9828
產(chǎn)品介紹:
熒光染料Hoechst 33342 具有一定的細(xì)胞膜透性，能少許進(jìn)入正常細(xì)胞膜，使其染上低藍(lán)色。Hoechst33342 可以用來復(fù)染細(xì)胞的細(xì)胞核。 對(duì)于非固定的活細(xì)胞來說，hoechst33342 可以起到區(qū)別凋亡和正常細(xì)胞的作用，因?yàn)榈蛲黾?xì)胞的膜通透性增強(qiáng)，因此進(jìn)入細(xì)胞中的Hoechst 33342 比正常細(xì)胞的多，熒光強(qiáng)度要比正常細(xì)胞中要高，此外，凋亡細(xì)胞的染色體DNA 對(duì)于細(xì)胞的稱染來說，可以配以適當(dāng)?shù)?.1% Triton X-100 通透，從而是所有細(xì)胞細(xì)胞核有效的染上hoechst 染料。 儲(chǔ)存：4℃，避光，有效期6個(gè)月。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
8-羥基脫氧鳥(8-OHdG)英文名：8-OHdG 1號(hào)染色體開放閱讀框194抗體包裝1g
70kDa熱休克蛋白8(HSPA8)英文名：HSPA8 1號(hào)染色體開放閱讀框198抗體包裝25g
70kDa熱休克蛋白5(HSPA5)英文名：HSPA5 1號(hào)染色體開放閱讀框21抗體包裝5g
70kDa熱休克蛋白1A(HSPA1A)英文名：HSPA1A 1號(hào)染色體開放閱讀框216抗體包裝1g
60kD熱休克蛋白(HSPD1)英文名：HSPD1 1號(hào)染色體開放閱讀框43抗體包裝25g
5羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(SERT)英文名：SERT 1號(hào)染色體開放閱讀框50抗體包裝5g
5-羥色胺(5-HT)英文名：5-HT 1號(hào)染色體開放閱讀框49抗體包裝1g
5-羥基乙(5-HIAA)英文名：5-HIAA 1號(hào)染色體開放閱讀框53抗體包裝5g
50kDa核孔蛋白(NUP50)英文名：NUP50 1號(hào)染色體開放閱讀框54抗體包裝1ml
27kDa熱休克蛋白(HSPB1)英文名：HSPB1 1號(hào)染色體開放閱讀框55抗體包裝5g
25-羥基維生D3(HVD3)英文名：HVD3 1號(hào)染色體開放閱讀框56抗體包裝100g
25kDa突觸關(guān)聯(lián)蛋白(SNAP25)英文名：SNAP25 1號(hào)染色體開放閱讀框65抗體包裝25g
210kDa核孔蛋白(NUP210)英文名：NUP210 1號(hào)染色體開放閱讀框64抗體包裝100g
20S-蛋白體(20S-PSM)英文名：20S-PSM 1號(hào)染色體開放閱讀框69抗體包裝25g
2',5'-寡腺合成1(OAS1)英文名：OAS1 1號(hào)染色體開放閱讀框77抗體包裝500g
馬氏副球菌Paracoccus│marcusii 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,三合物胰脂肪試劑盒異槲皮;Isoquercitrin
海假交替單胞菌Pseudoalteromonas│marina 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胰抑制試劑盒異鼠李-3-O-新橙皮;Isorha
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR胰腺癌標(biāo)志物CA242 原蘇木B;Protosappanin
Hoechst 33342染色液枯斑擬盤多毛孢 3--4-甲酰苯,95%磷二酯2
硬水黃桿 1-氟吡啶四氟鹽過氧化物
熱纖梭* ,4,6-基吡啶三氟磺鹽RecQ解旋樣蛋白5
肺形側(cè)耳 (R)-3-氨基四鹽鹽載脂蛋白A
纖維鏈霉 乙二二硫代縮氨基脲脂蛋白A
茄鏈格孢 N-Boc-L-環(huán)己基甘氨表皮調(diào)節(jié)
叢毛單胞 1-甲基吲唑-4-羧Derlin1蛋白
戊糖片球 Boc-1-氨基環(huán)烷甲血清運(yùn)鐵蛋白受體
布魯氏 生物Ⅵ型 戊鈉原鈣黏1
變紫青霉 2--3-甲基-4-(甲基磺酰)雌酮
尖孢鐮刀胡麻?；?/span> 5-氨基-2-三氟顆粒蛋白前體
梨形毛霉 O,O-二乙基二硫代磷, 一般為谷受體2A
屎腸球 庚乙酯生長(zhǎng)分化因子7
中慢生華癸根瘤 4,4'-亞甲基-雙(3--2,6-二乙基苯)骨成型蛋白8A
枯草芽孢桿 1-(2-芐氧基-4-氟苯基)乙酮生長(zhǎng)分化因子6
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
