原代兔淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞
英文名稱(chēng) | Rabbit Lymphatic Endothelial Cells | 組織來(lái)源 | 淋巴管 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 貨號(hào) | GOY-01X1517 |
培養(yǎng)信息:包被條件PLL(0.1mg/ml)或明膠(0.1%)
培養(yǎng)基含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%YI蛋白酶兔淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
兔淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞分離自淋巴管組織;淋巴管由毛細(xì)淋巴管匯合而成。其形態(tài)結(jié)構(gòu)與靜脈相似,但管徑較細(xì),管壁較薄,瓣膜較多且發(fā)達(dá),外形呈串珠狀。淋巴管根據(jù)其位置分為淺、深二種。它們管位于皮下,常與淺靜脈伴行,收集皮膚和皮下組織的淋巴。深淋巴管與深部血管伴行,收集肌肉和內(nèi)臟的淋巴。淺、深淋巴管之間有廣泛的交通支。淋巴管在向心行程中,通常經(jīng)過(guò)一個(gè)或多個(gè)淋巴結(jié),從而把淋巴細(xì)胞帶入淋巴液。主要功能是濾過(guò)淋巴液,產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞,參與機(jī)體的免疫反應(yīng)。當(dāng)局部感染時(shí),細(xì)菌、病毒或癌細(xì)胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴結(jié)腫大。如該淋巴結(jié)不能阻止和消滅它們,則病變可沿淋巴管的流注方向擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞(LEC)是襯覆于淋巴管內(nèi)表面的一種單層扁平上皮,是構(gòu)成淋巴管壁的主要結(jié)構(gòu),參與維持體液平衡,調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞再循環(huán)和機(jī)體的免疫反應(yīng)和組織液及蛋白質(zhì)的運(yùn)輸,在疾病過(guò)程中也起著重要作用。近年研究表明,LEC還在傷口愈合、淋巴管水腫和炎癥擴(kuò)散等病理過(guò)程中起重要作用,而且與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞主要功能:①調(diào)節(jié)體液、蛋白和組織壓力平衡;②為免疫系統(tǒng)的重要組成部分。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞與主要病生理變化:①囊腫型淋巴管瘤;②淋巴管炎;③淋巴結(jié)核。 |
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞采用中性蛋白MEI消化法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的兔淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)VEGFR3免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1. 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
2. 消化培養(yǎng)法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和 非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng),使團(tuán)塊膨松,由塊狀 變成 絮狀,此時(shí)再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠 瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
3. 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
4. 器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
1. 取材的組織要盡快培養(yǎng)。如若不能及時(shí)培養(yǎng),可將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi),放置于冰浴或4℃冰箱中,如果組織塊很大,應(yīng)切成1cm3以下的小塊再低溫保存,但時(shí)間不能超過(guò)24h。
2. 從消化道、周?chē)袎乃澜M織等污染因素存在的區(qū)域取材,可用含500~1000u/ml的青BSS液漂洗5~10min,或用10%注射液沖洗浸泡10min再作培養(yǎng)。
3. 組織塊不易貼壁,可預(yù)先在瓶壁涂薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。
4. 原代培養(yǎng)的1~2d內(nèi)要特別注意觀察是否有細(xì)菌、真菌、霉菌的污染,一旦發(fā)現(xiàn),要及時(shí)清除。
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小鼠雜交瘤細(xì)胞株;2D4 | 霍亂弧 O1/O139/CTX 群檢測(cè)試劑盒 ( 三重?zé)晒?PCR 法 ) |
HPAF-II人胰腺癌細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 副溶血性弧 / 單核細(xì)胞增生李斯特檢測(cè)試劑盒( 雙重?zé)晒?PCR 法 ) |
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HSF(SV40)人真皮成纖維(原代永生化)細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 | 沙門(mén)氏 / 志賀氏檢測(cè)試劑盒( 雙重?zé)晒?PCR 法 ) |
志賀氏(SH)檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) | 諾如病毒 I 型 / Ⅱ型檢測(cè)試劑盒( 雙重?zé)晒?PCR 法 ) |