產(chǎn)品名稱 | 原代兔脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 英文名稱 | Rabbit Choroidal Vascular Endothelial Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號 | GOY-01X1558 |
組織來源 | 脈絡(luò)膜組織 | 細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)信息：包被條件PLL（0.1mg/ml）或明膠（0.1%）
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%YI蛋白酶兔脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介：
兔脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自眼球脈絡(luò)膜組織；脈絡(luò)膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之間，含有豐富血管和色素細(xì)胞，對外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差，當(dāng)眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時，堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用，使脈絡(luò)膜在內(nèi)外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡(luò)膜呈暗褐色，圍繞視神經(jīng)乳頭部有照膜，為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū)。脈絡(luò)膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜，由纖維組織、小血管和毛細(xì)血管組成，軟而薄，棕紅色，在鞏膜和視網(wǎng)膜之間，續(xù)連于睫狀體后方。脈絡(luò)膜的血循環(huán)營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層，其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及玻璃體，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同時對視覺系統(tǒng)起保護(hù)作用，對整個視覺神經(jīng)有調(diào)節(jié)作用。續(xù)連于睫狀體后方，含豐富的血管和色素細(xì)胞，有營養(yǎng)和遮光作用。
方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋白MEI混合消化法并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 從胸部解剖乳鼠，取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中，盡可能的除去結(jié)締組織等，
3) 取肺邊緣部分，剪碎，將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中，倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中，
4) 2h后，培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基，小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱，確保組織塊不會飄起來，
5) 每3d換液2mL，待細(xì)胞從組織塊中爬出來后，隔2d換液，待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時，去除組織塊，將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。
MCF-7/Adr人乳腺癌耐藥細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | MCF-7+luc人乳腺癌熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
MDA-KB2人乳腺細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 柯薩奇病毒 B5 型檢測試劑盒 |
MDA-MB-157人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 柯薩奇病毒 B3 型檢測試劑盒 |
MDA-MB-231人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 柯薩奇病毒 A24 型檢測試劑盒 |
MDA-MB-231+GFP人乳腺癌X+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 腸道病毒 70 型檢測試劑盒 |
MDA-MB-231+LUC人乳腺癌熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 腺病毒通用型檢測試劑盒 |
MDA-MB-361人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | ?？刹《?/span> 11 型檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；4G1A6B4 | ?？刹《?/span> 30 型檢測試劑盒 |
MDA-MB-435S人黑瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 柯薩奇病毒 A2 型 / 柯薩奇病毒 A4 型 / 柯薩奇病毒 A5 型檢測試劑盒( 三重?zé)晒?PCR 法 ) |
MDA-MB-436人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 柯薩奇病毒 A4 型 / 柯薩奇病毒 A10 型 / 柯薩奇病毒 A6 型檢測試劑盒( 三重?zé)晒?PCR 法 ) |
MDA-MB-453人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 腸道病毒 / 腸道病毒 71 型 / 柯薩奇病毒 A16 型檢測試劑盒( 三重?zé)晒?PCR 法 ) |
MDA-MB-468人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 柯薩奇病毒 A2 型 / 柯薩奇病毒 A4 型檢測試劑盒( 雙重?zé)晒?PCR 法 ) |
ME-180人子宮頸表皮癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 原代兔脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞柯薩奇病毒 A6 型 / 柯薩奇病毒 A10 型檢測試劑盒( 雙重?zé)晒?PCR 法 ) |
MEG-01人成巨核白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 腸道病毒 71 型 / 柯薩奇病毒 A16 型檢測試劑盒( 雙重?zé)晒?PCR 法 ) |
色葡萄球(SA)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 柯薩奇病毒 B4 型檢測試劑盒 |
1、您收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作：
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代：
1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）棄上清，沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）待細(xì)胞貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存：
1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，再加入培養(yǎng)液終止消化，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）用適當(dāng)量的凍存液（基礎(chǔ)培養(yǎng)基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇：
1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中，滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞，然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中；
3）放置于37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）第二天，換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
