原代兔食管平滑肌細胞
培養(yǎng)信息：包被條件
培養(yǎng)基含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液：0.25%YI蛋白酶兔食管平滑肌細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
兔食管平滑肌細胞分離自食管組織；食管可分為頸段、胸段和腹段，脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連，腹段很短與胃相連。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，肌層上1/3段為骨骼肌，下1/3為平滑肌，中段為骨骼肌和平滑肌混合組成。其中，肌纖維的排列方式分為內(nèi)環(huán)形和外縱形兩層。食管的蠕動是由食管平滑肌收縮嚴格控制，食管還有括約肌，位于環(huán)狀軟骨水平的，稱為食管上括約??；位于食管下端，一部分在膈上，穿過膈孔，另一部分在膈下的高壓帶，稱為食管下括約肌。食管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)：大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。 |
方法簡介：
實驗室分離的兔食管平滑肌細胞采用YI蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的兔食管平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
英文名稱 | Rabbit Esophageal Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 食管組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
生長特性 | 貼壁 | 貨號 | GOY-01X1581 |
1. 取材的組織要盡快培養(yǎng)。如若不能及時培養(yǎng)，可將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi)，放置于冰浴或4℃冰箱中，如果組織塊很大，應(yīng)切成1cm3以下的小塊再低溫保存，但時間不能超過24h。
2. 從消化道、周圍有壞死組織等污染因素存在的區(qū)域取材，可用含500～1000u/ml的青BSS液漂洗5～10min，或用10%注射液沖洗浸泡10min再作培養(yǎng)。
3. 組織塊不易貼壁，可預(yù)先在瓶壁涂薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。
4. 原代培養(yǎng)的1～2d內(nèi)要特別注意觀察是否有細菌、真菌、霉菌的污染，一旦發(fā)現(xiàn)，要及時清除。
1. 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶（或皿）中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
2. 消化培養(yǎng)法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和 非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀 變成 絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠 瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。
3. 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
4. 器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
小鼠結(jié)腸黏膜上皮細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基 | 豬皮膚成纖維細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基 |
小鼠肺動脈平滑肌細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基 | 病毒性出血性敗血癥病毒（VHSV）RNA檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
小鼠卵巢顆粒細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基 | 傳染性胰臟壞死病病毒（IPNV）RNA檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基 | 流行性造血器官壞死病病毒（EHNV）檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞永生化+GFP細胞專用培養(yǎng)基 | 病毒性神經(jīng)壞死病毒（VNNV）RNA檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
小鼠內(nèi)皮祖細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基 | 真鯛虹彩病毒（RSIV）檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
小鼠角膜基質(zhì)細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基 | 流行性潰瘍綜合癥（EUS）檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
敘利亞倉鼠腎細胞；BHK21-XF-C13 | 羅湖病毒（TiLV）RNA檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
人支氣管平滑肌細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基 | 草魚出血病III型病毒（GCRV III）RNA檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
貓主動脈內(nèi)皮細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基 | 草魚出血病II型病毒（GCRV II）RNA檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
雞腎小管上皮細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基 | 草魚出血病I型病毒（GCRV I）RNA檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
大鼠乳腺成纖維細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基 | 鯉春病毒血癥病毒（SVCV）RNA檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
人肺微血管內(nèi)皮細胞 | 原代兔食管平滑肌細胞錦鯉皰疹病毒（KHV）檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
人II型肺泡上皮細胞 | 對蝦肝胰腺細小病毒（HPV）檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
惡性瘧原蟲（PF）檢測試劑盒（熒光PCR法） | 赤點石斑魚神經(jīng)壞死病毒（RGNNV）RNA檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
