原代兔視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞
培養(yǎng)信息:包被條件
培養(yǎng)基含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%YI蛋白酶兔視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
兔視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞分離自視神經(jīng)乳頭;視乳頭位于黃斑區(qū)鼻側(cè)附近,境界清楚,呈白色、圓盤狀,因此也稱為視盤。視網(wǎng)膜上視覺纖維在此匯集,并于此穿出眼球向視中樞傳遞。視乳頭中央有一小凹陷區(qū),稱為視杯或生理凹陷。視乳頭是視神經(jīng)纖維聚合組成視神經(jīng)的起始端,它沒有視細(xì)胞,因而沒有視覺,在視野中是生理盲點。視乳頭是開角型青光眼最早受損的部位,星形膠質(zhì)細(xì)胞是視神經(jīng)乳頭處主要的膠質(zhì)細(xì)胞類型,可為視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞無髓鞘的軸突提供結(jié)構(gòu)和生物支持。青光眼視神經(jīng)變是不可逆性致肓眼病。青光眼視神經(jīng)變以視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞軸突喪失并伴有視乳頭處細(xì)胞外基質(zhì)重坦為主要特征。導(dǎo)致視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞喪失的病理生理機(jī)制尚未闡明,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞對調(diào)控神經(jīng)元微環(huán)境起多重作用,越來越多的證據(jù)表明膠質(zhì)細(xì)胞町能對神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、損傷、修復(fù)及再生起極為關(guān)鍵的作用。視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞胞體多扁平,體積較大,形狀多呈不規(guī)則的多邊形,突起較粗,胞核為橢圓形,核仁清晰可見,核周有較密集物質(zhì),胞質(zhì)稀疏,骨架結(jié)構(gòu)良好,明顯不同于長梭形的成纖維細(xì)胞形態(tài):。 |
方法簡介:
實驗室分離的兔視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞采用YI蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法、結(jié)合差速貼壁制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
英文名稱 | Rabbit Optic Papilla Astrocyte Cells | 組織來源 | 眼球 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 |
生長特性 | 貼壁 | 貨號 | GOY-01X1573 |
1. 取材的組織要盡快培養(yǎng)。如若不能及時培養(yǎng),可將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi),放置于冰浴或4℃冰箱中,如果組織塊很大,應(yīng)切成1cm3以下的小塊再低溫保存,但時間不能超過24h。
2. 從消化道、周圍有壞死組織等污染因素存在的區(qū)域取材,可用含500~1000u/ml的青BSS液漂洗5~10min,或用10%注射液沖洗浸泡10min再作培養(yǎng)。
3. 組織塊不易貼壁,可預(yù)先在瓶壁涂薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。
4. 原代培養(yǎng)的1~2d內(nèi)要特別注意觀察是否有細(xì)菌、真菌、霉菌的污染,一旦發(fā)現(xiàn),要及時清除。
1. 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
2. 消化培養(yǎng)法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和 非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團(tuán)塊膨松,由塊狀 變成 絮狀,此時再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠 瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長。
3. 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
4. 器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
人主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞 | 人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
人冠狀動脈平滑肌細(xì)胞 | 副豬嗜血桿(HPS)檢測試劑盒 |
人頸動脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)檢測試劑盒(恒溫?zé)晒夥ǎ?/span> |
人頸動脈平滑肌細(xì)胞 | 豬繁殖與呼吸綜合征病毒高致病型(HP-PRRSV)RNA檢測試劑盒(恒溫?zé)晒夥ǎ?/span> |
人主動脈平滑肌細(xì)胞 | 豬繁殖與呼吸綜合征病毒美洲型(PRRSV-US)RNA檢測試劑盒(恒溫?zé)晒夥ǎ?/span> |
人頸靜脈球瘤細(xì)胞 | 非洲豬瘟病毒(ASFV)檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) |
人動脈外膜成纖維細(xì)胞 | 非洲豬瘟病毒(ASFV)檢測試劑盒(帶內(nèi)參,PCR-熒光探針法) |
鴨胚胎成纖維細(xì)胞 | 菜豆莢斑駁病毒(BPMV)RNA檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) |
人肝動脈平滑肌細(xì)胞 | 豬流行性腹瀉病毒(PEDV)RNA檢測試劑盒(恒溫?zé)晒夥ǎ?/span> |
人腔靜脈平滑肌細(xì)胞 | 豬圓環(huán)病毒2型(PCV-2)檢測試劑盒(恒溫?zé)晒夥ǎ?/span> |
人腔靜脈外膜成纖維細(xì)胞 | 豬繁殖與呼吸綜合征病毒歐洲型(PRRSV-EU)RNA檢測試劑盒(恒溫?zé)晒夥ǎ?/span> |
人主動脈外膜成纖維細(xì)胞 | z豬胸膜肺炎防線桿(APP)檢測試劑盒(恒溫?zé)晒夥ǎ?/span> |
人食管上皮細(xì)胞 | 原代兔視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞豬偽狂犬病毒(PRV)檢測試劑盒(恒溫?zé)晒夥ǎ?/span> |
人食管平滑肌細(xì)胞 | 經(jīng)典豬瘟病毒(CSFV)RNA檢測試劑盒(恒溫?zé)晒夥ǎ?/span> |
嗜吞噬細(xì)胞無形體(AP)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 非洲豬瘟病毒探針LAMP檢測試劑盒(快靈) |