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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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BEL-7404人肝癌細(xì)胞實驗過程注意事項2025/07/24
?在BEL-7404人肝癌細(xì)胞實驗過程中,除了常規(guī)的無菌操作和細(xì)胞培養(yǎng)條件控制外,還需特別注意以下幾點:1.細(xì)胞傳代時機(jī)把控該細(xì)胞系貼壁生長時易形成重疊堆積,建議在融合度達(dá)80%-90%時立即傳代。過度生長會導(dǎo)致細(xì)胞間接觸抑制增強(qiáng),影響后續(xù)實驗數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。傳代時建議采用0.25%-0.02%EDTA混合消化液,終止消化后需輕柔吹打以避免細(xì)胞團(tuán)塊形成。2.特殊培養(yǎng)基要求基礎(chǔ)培養(yǎng)基中需添加10%胎牛血清和1%雙抗,但需注意該細(xì)胞系對血清批次敏感性強(qiáng)。新批次血清使用前應(yīng)進(jìn)行72小時生長曲線測試,若發(fā)現(xiàn)
粘蛋白-1單克隆抗體操作注意事項2025/07/17
粘蛋白-1單克隆抗體操作注意事項:實驗環(huán)境控制1.溫濕度管理:抗體儲存及操作環(huán)境需保持恒溫(2-8℃)和適宜濕度(40%-60%),避免反復(fù)凍融導(dǎo)致蛋白變性。實驗臺面應(yīng)提前預(yù)冷,縮短抗體在室溫下的暴露時間。2.無菌操作:分裝或稀釋時需在超凈工作臺中進(jìn)行,使用無菌移液槍頭及EP管,避免微生物污染影響抗體效價。樣本處理要點1.抗原修復(fù)優(yōu)化:針對不同組織類型(如石蠟切片或冰凍切片),需測試熱修復(fù)(pH6.0或9.0緩沖液)或酶消化法的適用性,避免過度修復(fù)導(dǎo)致表位破壞。2.封閉劑選擇:推薦使用5%BSA
大鼠孤腓肽ELISA檢測試劑盒樣本處理及要求2025/07/07
大鼠孤腓肽ELISA檢測試劑盒樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照
微細(xì)毛圓線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒實驗規(guī)則2025/06/25
微細(xì)毛圓線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒實驗規(guī)則:1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時。3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。4、實驗時,要使底物避光保存。5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。7、將液體加
鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒實驗注意事項2025/05/29
鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒實驗注意事項:1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。實時熒光定量PCR(quantitativereal-timePCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線
大鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞永生化細(xì)胞操作注意事項2025/05/15
在操作大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞永生化細(xì)胞系時,需特別注意培養(yǎng)環(huán)境的無菌性。實驗前需用75%酒精擦拭超凈工作臺,紫外線照射30分鐘以上,并提前預(yù)熱培養(yǎng)基至37℃。傳代時建議使用低濃度(0.05%-0.1%)進(jìn)行短時消化,密切觀察細(xì)胞形態(tài)變化,當(dāng)細(xì)胞邊緣開始回縮時立即加入含血清的培養(yǎng)基終止反應(yīng)。對于凍存與復(fù)蘇環(huán)節(jié),推薦采用程序性降溫盒進(jìn)行梯度凍存,凍存液中應(yīng)包含10%DMSO和20%胎牛血清。復(fù)蘇時需快速解凍,37℃水浴中輕柔搖晃至冰晶消失后,立即轉(zhuǎn)移至預(yù)熱的培養(yǎng)基中離心去除凍存液。換液應(yīng)在培養(yǎng)4
人科研PCR檢測試劑反應(yīng)五要素2025/04/15
人科研PCR檢測試劑反應(yīng)五要素:參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:①引物長度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴(kuò)增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+
丹毒桿菌(SER)核酸檢測試劑盒反應(yīng)流程常規(guī)程序2025/03/26
丹毒桿菌(SER)核酸檢測試劑盒反應(yīng)流程常規(guī)程序:將PCR反應(yīng)所需的成分配置完后,在PCR儀上于94-96℃預(yù)加熱幾十秒至幾分鐘,使模板DNA充分變性,然后進(jìn)入擴(kuò)增循環(huán)。在每一個循環(huán)中,先于94℃保持30秒鐘使模板變性,然后將溫度降到復(fù)性溫度(一般50-60℃之間),一般保持30秒鐘,使引物與模板充分退火;在72℃保持1分鐘(擴(kuò)增1kb片段),使引物在模板上延伸,合成DNA,完成一個循環(huán)。重復(fù)這樣的循環(huán)25~35次,使擴(kuò)增的DNA片段大量累積。最后,在72℃保持3-7min,使產(chǎn)物延伸完整,4℃
大鼠雪旺氏細(xì)胞注意事項2025/03/19
大鼠雪旺氏細(xì)胞注意事項一、取材與分離1.快速操作-組織取材后需立即處理,避免長時間暴露于室溫或非營養(yǎng)環(huán)境。-使用無菌PBS或生理鹽水沖洗組織,去除血液、雜質(zhì)。2.消化酶選擇-根據(jù)組織類型選擇消化酶,避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞損傷。-消化時間需嚴(yán)格控制(通常10-30分鐘),可通過顯微鏡觀察細(xì)胞解離狀態(tài)。二、培養(yǎng)條件優(yōu)化1.培養(yǎng)基選擇-使用含血清或特定生長因子的培養(yǎng)基(如DMEM、RPMI1640等),部分細(xì)胞需添加胰島素、EGF等。-避免頻繁更換培養(yǎng)基品牌或批次,減少細(xì)胞適應(yīng)壓力。2.貼壁與傳代-原代
人水通道蛋白-2elisa檢測試劑盒使用方法2025/03/12
人水通道蛋白-2elisa檢測試劑盒使用方法1.樣品處理(樣本處理區(qū))1.1樣本前處理按照試劑盒操作說明或者微生物樣品處理方法做好樣品前處理。1.2DNA提取根據(jù)您實驗室的具體情況和樣品類型,選擇適當(dāng)?shù)奶崛〔呗苑椒?。為了使實驗結(jié)果穩(wěn)定、有效、可靠,我們建議使用商品化的試劑盒進(jìn)行提取,嚴(yán)格按照對應(yīng)試劑盒說明書進(jìn)行操作,樣本核酸提取過程中應(yīng)避免污染,提取好的模板樣品如不能立即檢測,建議-15℃以下保存。推薦采用我們公司研發(fā)生產(chǎn)的試劑盒:Hypure病毒基因組DNA提取試劑盒2.試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))
雞一氧化氮(NO)elisa檢測試劑盒樣本處理及要求2025/02/27
雞一氧化氮(NO)elisa檢測試劑盒樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦
B類清道夫受體2ELIS檢測試劑盒操作步驟2025/02/08
B類清道夫受體2ELIS檢測試劑盒操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第
大鼠阿立新A(Orexin A)elisa檢測試劑盒樣本處理及要求2025/01/22
大鼠阿立新A(OrexinA)elisa檢測試劑盒樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心
KORSER氏檸檬酸鹽肉湯操作步驟2025/01/16
KORSER氏檸檬酸鹽肉湯操作步驟根據(jù)不同的資料來源,KORSER氏檸檬酸鹽肉湯的操作步驟略有不同。以下是兩種常見的操作步驟:方法一稱取:稱取本品4.7克。溶解:將稱好的4.7克KORSER氏檸檬酸鹽肉湯溶解于1000毫升蒸餾水中。分裝:將溶解好的溶液分裝到試管中,每管10毫升。滅菌:將分裝好的試管在121℃下高壓滅菌15分鐘。備用:滅菌完成后,冷卻至室溫,備用。4方法二稱?。悍Q取本品5.7克。溶解:將稱好的5.7克KORSER氏檸檬酸鹽肉湯溶解于1000毫升蒸餾水或去離子水中(可根據(jù)需要按比例
Human sFASL/Apo-1 Elisa試劑盒樣本處理及要求2024/12/18
HumansFASL/Apo-1Elisa試劑盒樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA免費(fèi)代測試劑盒?2024/12/04
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA免費(fèi)代測試劑盒樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有
神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞;H4注意事項2024/11/27
神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞;H4注意事項在處理和研究神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞H4時,我們必須嚴(yán)格遵守一系列注意事項,以確保實驗的準(zhǔn)確性和安全性。首先,H4細(xì)胞的培養(yǎng)環(huán)境至關(guān)重要。它們需要在恒溫、恒濕、無菌的條件下進(jìn)行培養(yǎng),任何微小的環(huán)境波動都可能對細(xì)胞的生長和分裂產(chǎn)生不利影響。因此,我們必須定期檢查培養(yǎng)箱的性能,確保其始終處于最佳狀態(tài)。其次,細(xì)胞的傳代操作要謹(jǐn)慎。在傳代過程中,我們必須嚴(yán)格控制細(xì)胞的密度和分裂次數(shù),以避免細(xì)胞的老化和變異。同時,傳代用的培養(yǎng)基和試劑必須新鮮、無污染,以防止外部因素干擾實驗結(jié)果。此外,對
狼源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒使用方法2024/11/22
狼源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒使用方法:一、樣品采集:1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)1.注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣
小窩蛋白-1免疫組化試劑盒注意事項2024/11/15
小窩蛋白-1免疫組化試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物請避光保存。6.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).7.所有樣品,洗滌液和各種
雜交瘤細(xì)胞株;3H3F6培養(yǎng)注意事項2024/10/31
雜交瘤細(xì)胞株;3H3F6培養(yǎng)注意事項:1.收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。2.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。3.用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色
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