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原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法的新突破

時間:2018/6/12閱讀:228
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原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染時,電穿孔是一種常用的方法。它利用電脈沖瞬時電擊細(xì)胞的質(zhì)膜,提高其通透性,從而促進分子(如核酸或蛋白)的進入。然而,這種方法會造成細(xì)胞存活率低,且細(xì)胞之間的轉(zhuǎn)染效果不一致。為了解決這些問題,西北大學(xué)的研究人員開發(fā)出一種新工具,用于單細(xì)胞的轉(zhuǎn)染。
這種新方法被稱為納米鋼筆探針電穿孔(nanofountain probe electroporation,NFP-E),讓研究人員可通過細(xì)胞表面的臨時納米孔將分子導(dǎo)入特定細(xì)胞內(nèi),這些納米孔是通過對細(xì)胞的一小部分施加局部電場而形成的。研究人員可調(diào)整電脈沖的持續(xù)時間,從而控制劑量,這是的。
文章的通訊作者,西北大學(xué)機械工程系的Horacio Espinosa教授表示:“這實在是令人興奮。將分子導(dǎo)入單細(xì)胞的能力正是生物技術(shù)研究人員所需的,可推進治療、診斷及藥物輸送的發(fā)展,有望實現(xiàn)個性化醫(yī)療的承諾。”
NFP-E是基于Espinosa實驗室開發(fā)的納米鋼筆探針(NFP)技術(shù)。NFP-E芯片是一種微加工的懸臂探針芯片,其中整合了微流體通道。在單細(xì)胞轉(zhuǎn)染應(yīng)用中,他們將探針與電極和流體控制系統(tǒng)相結(jié)合,通過顯微操縱器或原子力顯微鏡實現(xiàn)定位控制。這一集成的系統(tǒng)實現(xiàn)了整個轉(zhuǎn)染過程,并通過光學(xué)顯微鏡對轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞反應(yīng)進行監(jiān)測。
經(jīng)研究證實,這一技術(shù)相當(dāng)可靠,而且是多功能的。研究人員已使用NFP-E芯片將多糖、蛋白、DNA發(fā)夾結(jié)構(gòu)和質(zhì)粒DNA成功轉(zhuǎn)染到HeLa細(xì)胞。它不僅具有原代細(xì)胞選擇性,轉(zhuǎn)染效率也很高(達(dá)95%),且細(xì)胞存活率也非常高(達(dá)92%)。

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