陳小姐
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人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5537LC實(shí)驗(yàn)方法
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN操作步驟
人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5538LC培養(yǎng)
細(xì)胞名稱 人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS操作步驟
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 人胚肺二倍體細(xì)胞,來(lái)自于女孩胚胎,1976年由北京生物制品研究所建株
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 新生牛血清,10%;水解乳蛋白,10%
傳代方法 1:2-1:4
傳代情況 P21
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X; D7S820:8,11;CSF1PO:10,12;D13S317:8,11;D16S539:9,12;D18S51:14,17;D21S11:29,30;D3S1358:15;D5S818:11;D8S1179:11,13;FGA:19,22;PentaD:11,13;PentaE:7,11;TH01:7,9;TPOX:8,10;vWA:18
同工酶 人B,NP,G7PG,MD,AST
染色體
使用權(quán)限 A類
人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒 ,英文名: NADPH ELISA Kit
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)ELISA試劑盒 ,英文名: NAD ELISA Kit
牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP-1)ELISA試劑盒 ,英文名: CEMP-1 ELISA Kit
牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)ELISA試劑盒 ,英文名: DMP1 ELISA Kit
循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA試劑盒 ,英文名: CIC ELISA Kit
血影蛋白(spectrin)ELISA試劑盒 ,英文名: spectrin ELISA Kit
血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGFsR-α ELISA Kit
血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGF-AB ELISA Kit
血小板源性生長(zhǎng)因子D(PDGF-D)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGF-D ELISA Kit
血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒 ,英文名: PF-4/CXCL4 ELISA Kit
血小板因子4(PF4)ELISA試劑盒 ,英文名: PF4 ELISA Kit
血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒 ,英文名: PF-3 ELISA Kit
血小板衍生生長(zhǎng)因子CC(PDGF-CC)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGF-CC ELISA Kit
血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGF-BB ELISA Kit
蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor Bufarenogin 沙蟾毒精 17008-69-4 C24H32O7 ≥98%
蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor Cinobufagin 華蟾酥毒基 470-37-1 C26H34O6 ≥98%
蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor Cinobufotalin 華蟾毒它靈 1108-68-5 C26H34O7 ≥98%
蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor Gamabufotalin 日蟾蜍他靈 465-11-2 C24H34O5 ≥98%
蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor Resibufogenin 酯蟾毒配基 465-39-4 C24H32O4 ≥98%
蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor ocinobufagin 遠(yuǎn)華蟾蜍精 472-26-4 C24H34O5 ≥98%
潺槁木姜子Litsea glutinosa Boldine 波爾定堿 476-70-0 C19H21NO4 ≥98%
潺槁木姜子Litsea glutinosa Brevilin A 短葉老鶴草素 A 16503-32-5 C20H26O5 ≥90%
人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS操作步驟潺槁木姜子Litsea glutinosa Litseglutine B N-甲基-O10-甲基蓮葉桐文 25368-01-8 C20H23NO4 ≥96%
潺槁木姜子Litsea glutinosa Lycoclavanol 石松醇 13956-51-9 C30H50O3 ≥98.5%
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