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人胚肺成纖維細胞;Walvax-2操作步驟

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更新時間:2017-05-16 15:49:10瀏覽次數(shù):486次

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人胚肺成纖維細胞;Walvax-2操作步驟現(xiàn)貨供應,質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

細胞名稱      人胚肺成纖維細胞;Walvax-2操作步驟
形態(tài)特性       成纖維細胞樣
生長特性      貼壁生長
特征特性       該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件       MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法       1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況      C5
凍存條件       基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測      陰性
STR      
同工酶      
染色體      
使用權(quán)限      未定 
人胚肺成纖維細胞;Walvax-2操作步驟細胞培養(yǎng)
1、冷凍管應如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細胞大都無法立即適應, 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
人胚肺成纖維細胞;Walvax-2操作步驟復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內(nèi)膜細胞等。細胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導,另有細胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
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豬皮質(zhì)醇(Cortisol)免疫試劑盒    Porcine Cortisol ELISA Kit
豬凝血因子XIIIB鏈(F13B)免疫試劑盒    Pig Coagulation factor XIII B chain,F13B ELISA kit
豬凝血因子XIIIA鏈(F13A1)免疫試劑盒    Pig Coagulation factor XIII A chain,F13A1 ELISA kit
豬凝血因子X(F10)免疫試劑盒    Pig coagulation factor X,F10 ELISA kit
豬凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)免疫試劑盒    Pig coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA Kit
豬凝血因子Ⅶ(FⅦ)免疫試劑盒    Pig coagulation factor Ⅶ,FⅦ ELISA Kit
豬凝血因子Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒    Pig coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit
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