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人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞;Trex-293操作步驟

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更新時間:2017-05-16 16:40:57瀏覽次數(shù):177次

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人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞;Trex-293操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

細(xì)胞名稱      人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞;Trex-293操作步驟
形態(tài)特性       上皮樣;多角
生長特性      貼壁生長
特征特性       該細(xì)胞在293細(xì)胞的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改造,在含有滅瘟素的培養(yǎng)基中穩(wěn)定表達(dá)四環(huán)素阻遏,且重組腺病毒產(chǎn)率高于其他細(xì)胞的產(chǎn)率。 
培養(yǎng)條件       MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS + Blasticidin
傳代方法       1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況      PN5
凍存條件       基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測      陰性
STR      
同工酶      
染色體      
使用權(quán)限      A類
人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞;Trex-293操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞;Trex-293操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
膠轉(zhuǎn)蛋白(TAGLN)ELISA試劑盒    ,英文名:    TAGLN ELISA Kit
膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒    ,英文名:    GFAP ELISA Kit
膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒    ,英文名:    GDNF ELISA Kit
膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒    ,英文名:    GDNF ELISA Kit
膠原凝集素(Collectin)ELISA試劑盒    ,英文名:    Collectin ELISA Kit
膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒    ,英文名:    Collagenase II ELISA Kit
膠原酶I(Collagenase I)ELISA試劑盒    ,英文名:    Collagenase I ELISA Kit
膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒    ,英文名:    HCBⅡ ELISA Kit
膠原吡啶交聯(lián)(PYD)ELISA試劑盒    ,英文名:    PYD ELISA Kit
降脂素(Adipsin)ELISA試劑盒    ,英文名:    Adipsin ELISA Kit
降解加速因子(DAF)ELISA試劑盒    ,英文名:    DAF ELISA Kit
降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒    ,英文名:    PCT ELISA Kit

小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)免疫試劑盒    Mouse eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit
小鼠神經(jīng)生長因子(NGF)免疫試劑盒    Mouse Nerve growth factor,NGF ELISA kit
小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)免疫試劑盒    Mouse glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit
小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4(NRG4)免疫試劑盒    Mouse neuregulin-4,NRG4 ELISA kit
小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3(NRG3)免疫試劑盒    Mouse neuregulin-3,NRG3 ELISA kit
小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(NRG2)免疫試劑盒    Mouse neuregulin-2,NRG2 ELISA kit
小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG1)免疫試劑盒    Mouse neuregulin-1,NRG1 ELISA kit
小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)免疫試劑盒    Mouse Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit
小鼠山梨醇脫氫酶(SDH)免疫試劑盒    Mouse sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit
人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞;Trex-293操作步驟小鼠沙眼衣原體抗體IgG(CT IgG)免疫試劑盒    Mouse anti-Chlamydia trachomatis(CT)-IgG Elisa kit
小鼠殺傷細(xì)胞凝集素樣受體亞家族B, 成員1C(Klrb1c/Ly55c/Nkrp1c)免疫試劑盒    Mouse Killer cell lectin-like receptor subfamily B member 1C(Klrb1c/Ly55c/Nkrp1c)ELISA Kit
小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)免疫試劑盒    Mouse pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit

  

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